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目的:探讨肼苯哒嗪对雌激素受体(ER)α阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231 ERα基因启动子区CpG岛DNA甲基化的影响。方法:ERα阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231。体外细胞培养,按药物浓度分为4组:分别用0、5、10、20μmol/L的肼苯哒嗪干预ERα阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞96 h;按药物作用时间分为4组:分别于0、72、96、120 h 10μmol/L肼苯哒嗪干预ERα阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞。倒置光学显微镜下观察肼苯哒嗪对细胞生长的影响。各组提取MDA-MB-231细胞总RNA ,用RT-PCR及图像分析检测肼苯哒嗪对MDA-MB-231细胞ERαmRNA表达的影响;提取MDA-MB-231细胞基因组DNA,纯化、修饰后用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测肼苯哒嗪对MDA-MB-231细胞ERα基因启动子区CpG岛甲基化的影响。结果:1. RT-PCR检测结果显示,肼苯哒嗪上调MDA-MB-231细胞ERαmRNA表达。与对照组比较, 96 h,5、10、20μmol/L肼苯哒嗪组ERα/β-actin光密度积分值比值均明显升高(p<0.05或p<0.01); 72、96、120 h 10μmol/L肼苯哒嗪组ERα/β-actin光密度积分值比值均明显升高(p<0.05或p<0.01)。2.肼苯哒嗪逆转MDA-MB-231细胞ERα基因启动子区CpG岛甲基化状态。未经肼苯哒嗪干预的ERα阴性人乳腺癌细胞MDA-MB-231 ERα基因呈甲基化状态;5μmol/L的肼苯哒嗪干预MDA-MB-231细胞120 h后, ERα基因呈部分去甲基化状态;而经10μmol/L肼苯哒嗪干预细胞120 h后, ERα基因呈完全去甲基化状态。结论:1. ERα阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231 ERα基因启动子区CpG岛DNA甲基化可能是导致ERα基因表达沉默的主要原因。2.肼苯哒嗪可以逆转乳腺癌细胞株MDA-MB-231 ERα基因启动子区CpG岛甲基化状态,诱导沉默基因重新表达。