修饰链霉亲和素的核壳型磁性纳米粒子在RNA分离中的研究

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氧化铁磁性纳米粒子可以通过多种方法制备得到,通过表面化学修饰可以得到无机SiO2包覆的核壳结构的复合磁性纳米粒子。其壳结构既具有生物适应性,又具有可键合生物分子(如细胞、蛋白质、酶和抗体等)的活性基团,其核具有超强顺磁性。本文通过对氧化铁磁性纳米粒子的制备,修饰和分离的研究,使磁性纳米粒子分离器有了更好的应用。(1)首先采用工沉淀的方法,在碱性条件下共沉淀Fe2+和Fe3+离子混合物,通过调节pH值和介质粒子强度防止粒子沉聚,并将粒子尺寸控制在一个标准内。(2)采用反相微乳液的方法,利用正硅酸乙酯在碱性条件下水解,在γ-Fe2O3的表面包裹一层SiO2。实验结果表明在磁核γ-Fe2O3的表面成功地包裹了SiO2层,形成了核壳型磁性纳米粒子;而且在合适的条件下,合成的核壳型磁性纳米粒子具有均匀的粒径和良好的单分散性。(3)再在包覆SiO2的颗粒上修饰[N-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三甲氧基硅烷] (AEAPS),再通过链霉亲和素将生物素标记的Oligo(dT)修饰在纳米颗粒的表面,构建了一种具超顺磁性的RNA纳米分离器,此探针可特异性地结合目标RNA,从而可实现其对互补的RNA片段的高效快速分离和富集。
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