本文对小鼠ICSI条件以及精子去膜进行了研究，尝试将精子载体转基因法与单精子胞浆内注射技术结合起来建立转基因RNAi小鼠模型。实验结果表明ICSI对小鼠卵膜损伤较大，ICR小鼠卵子注射后1h成活率仅有30.3％。我们通过对ICSI条件进行摸索，改善了操作液、环境温度以及小鼠品系等因素后，将ICSI成活率提高到80％以上；通过小鼠去膜方法的比较，结果表明超声、NaOH以及溶血卵磷脂都能较好的去除小鼠精子质膜，去膜率都在90％以上，且三种方法对小鼠精子DNA没有显著性损伤，但是超声方法相对操作简单、快捷；在此基础上，我们采用超声对精子进行去膜然后与不同浓度干扰质粒共孵育，再通过ICSI将带有质粒的精子头注射到B6D2F1卵子中，观察胚胎发育以及荧光表达情况，结果发现质粒浓度为1ng/ul，转基因效率最高，且不影响胚胎发育；通过胚胎移植，目前已出生转基因RNAi小鼠。本实验充分表明ICSI精子载体法建立转基因RNAi小鼠模型的可行性。此外本课题通过对野生小家鼠精子冷冻方法的研究，尝试建立一种能够提高小鼠精子冷冻保存效率的方法，为转基因RNAi小鼠种质资源库的建立提供基础。