人甲状旁腺素(human parathyroid hormone,hPTH)是人甲状旁腺主细胞分泌的活性多肽,通过调节骨骼、肾脏等细胞来维持血钙和磷酸盐的自身稳定。甲状旁腺素1-34(PTH 1-34)完全保留了这种活性,具有与全长PTH相同的生理功能及受体结合能力,促进骨生成,增加骨强度。因此,生产重组PTH 1-34蛋白,可作为理想的治疗骨质疏松症药物,应用于临床科学研究。为了获得高产量的重组PTH 1-34纯品,本研究进行了以下几方面的工作:利用基因重组技术构建PTH 1-34真核表达载体pPICZα-PTH(1-34),电转化入毕赤酵母X-33后,经PCR鉴定,SDS-PAGE,Western Blot,ELISA等检测方法,证明了在毕赤酵母中成功地诱导分泌了PTH 1-34。在此基础上,筛选出稳定高效分泌表达PTH 1-34的工程菌株。对PTH 1-34的表达条件进行了初步优化,为将来大规模发酵奠定了基础。同时对表达产物的纯化条件进行研究,得到了含量较高的纯品。本实验的创新之处在于:构建了高效分泌表达PTH1-34的毕赤酵母工程菌,并对表达条件和产品的纯化条件进行优化研究,建立了发酵和纯化的新方法。