论文部分内容阅读
目的：本研究旨在探索在双侧阴茎海绵体神经(cavernous nerve, CN)损伤的大鼠神经性勃起功能障碍(neurogenic erectile dysfunction, NED)模型中,向阴茎海绵体注射骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BM-MSCs)对大鼠阴茎海绵体神经的修复作用及其可能的机制。方法： 选取24只8周龄、体重200-250g雄性SD大鼠随机分为3组：第1组为假手术组(Sham组),找到双侧海绵体神经后不做处理直接关腹并缝合皮肤；其余两组均通过钳夹的方式损伤双侧阴茎海绵体神经建立NED模型,随后关腹并缝合皮肤。第1组和第2组(对照组(Crush组))注入空白对照剂,第3组(BM-MSC组)向阴茎海绵体内注射BM-MSCs(1×106)。术后8周采用电刺激CN记录阴茎海绵体内压(ICP),颈动脉穿刺测定平均动脉压(MAP),ICP/MAP作为勃起功能的评价指标来评估大鼠的勃起功能。勃起功能检测后处死大鼠,取阴茎海绵体中段组织进行以下检测：马松三色染色检测大鼠阴茎海绵体纤维化程度；Actin染色检测大鼠阴茎海绵体内平滑肌含量；免疫荧光检测大鼠阴茎海绵体内NF阳性神经纤维数目、神经型一氧化氮合成酶(nNOS)的表达水平；免疫组化检测大鼠阴茎海绵体内神经营养因子-3(neurotrophin-3, NT-3)和神经营养因子-4(neurotrophin-4, NT-4)的表达水平。结果：手术后8周,通过电刺激海绵体神经测得ICP以及ICP/MAP来评价大鼠的勃起功能,其中假手术组大鼠的ICP平均最大ICP为(150.32±7.44) cmH2O, ICP/MAP为(1.091+0.058),对照组为(100.48±5.97)(cmH2O, ICP/MAP为(0.7954±0.045),BM-MSCs组为(131.80±9.52) cmH2O, ICP/MAP为(0.902±0.048)。处死大鼠后取大鼠阴茎中段阴茎海绵体组织,马松三色染色发现BM-MSCs组阴茎海绵体组织纤维化程度低于对照组；Actin染色提示BM-MSCs组阴茎海绵体内平滑肌含量高于对照组；免疫荧光检测BM-MSCs组阴茎海绵体内NF阳性神经纤维数目高于对照组；BM-MSCs组阴茎海绵体组织内表达nNOS的细胞明显多于对照组；免疫组化检测发现BM-MSCs组中BM-MSCs细胞的NT-3与NT-4的表达高于对照组及假手术组。结论：阴茎海绵体内注射BM-MSCs能对双侧CN损伤大鼠的勃起功能恢复有促进作用,并能提高海绵体组织中平滑肌、神经丝、神经型一氧化氮合成酶、NT-3以及NT-4的含量。