论文部分内容阅读
目的比较固本健脑法、补肾健脑法及补脾健脑法对老年健忘大鼠学习记忆功能及海马组织中RAGE/NF-κB信号通路的影响,综合评价三者的疗效差异,初步揭示固本健脑法改善老年健忘的部分分子机制。方法SPF级健康雄性SD大鼠110只适应性喂养1周后,用跳台法筛选学习记忆能力相似者100只,随机分为造模组85只、正常组15只,使用腹腔注射NaNO2及D-半乳糖（D-Gal）造模,1次/d,共40d。造模成功大鼠共75只,将其随机分成固本组、补肾组、补脾组、西药组、模型组,每组15只,固本组、补肾组、补脾组、西药组分别灌以固本健脑方、六味地黄丸、归脾丸水煎液和石杉碱甲混悬液,正常组和模型组则灌以等体积的0.9%NaCl溶液,1次/d,共20d。给药结束后,用跳台法及水迷宫法测试其学习记忆能力。行为学测试完毕后,取大鼠海马组织,检测AGEs的含量（免疫组化法）,RAGE、NF-κB p65的表达（Western Blot）,Aβ1-42、IL-1β、TNF-α的含量（ELISA）。结果1老年健忘动物模型的建立与空白组比较,造模组大鼠毛发枯黄,唇爪暗红粗糙,活动迟缓,饮食精神差,呈明显的衰老状态;在跳台法测试中,造模组动物潜伏期缩短（P<0.05）、5min出错次数增多（P<0.05）;在水迷宫定位航行实验中,模型组潜伏期延长（P<0.05）、游泳总路程增多（P<0.05）;在水迷宫空间探索实验中,模型组经过原平台位置次数及在目标象限停留时间减少（P<0.05）、首次抵达目标范围的时间变长（P<0.05）。2固本健脑法对大鼠学习记忆能力的影响与空白组比较,在跳台法测试中,模型组大鼠潜伏期变缩短（P<0.05）,5min出错次数增多（P<0.05）,在水迷宫定位航行实验中,模型组潜伏期延长（P<0.05）,游泳总路程增多（P<0.05）,在水迷宫空间探索实验中,模型组经过原平台位置的次数及在目标象限停留时间减少（P<0.05）,首次抵达目标范围时间变长（P<0.05）;各给药组和空白组比较结果同上,与模型组比较则相反;补肾组、补脾组、西药组与固本组比较,结果与模型组、空白组二者相比较一致;补肾组、补脾组、西药组组间比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。3固本健脑法对大鼠海马组织中AGEs、Aβ1-42的影响与空白组比较,模型组、补肾组、补脾组、西药组AGEs、Aβ1-42的表达上调（P<0.05）,固本组AGEs的表达上调,Aβ1-42则差异无统计学意义。与模型组比较,各给药组AGEs、Aβ1-42的表达均下调（P<0.05）;与固本组比较,其余给药组AGEs、Aβ1-42的表达上调（P<0.05）;补肾组、补脾组、西药组组间两两比较,差异皆无统计学意义（P>0.05）。4固本健脑法对大鼠海马组织中RAGE、NF-κBp65的影响与空白组比较,模型组及各给药组RAGE、NF-κBp65的表达上调（P<0.05）;与模型组比较,各给药组RAGE、NF-κBp65的表达均下调（P<0.05）;与固本组比较,其余给药组RAGE、NF-κBp65的表达上调（P<0.05）;补肾组、补脾组、西药组组间比较,差异皆无统计学意义（P>0.05）。5固本健脑法对大鼠海马组织中IL-1β、TNF-α的影响与空白组比较,模型组及各给药组IL-1β、TNF-α的相对含量增多（P<0.05）。与模型组比较,各给药组IL-1β、TNF-α的相对含量减少（P<0.05）,与固本组比较,其余给药组IL-1β、TNF-α的相对含量增多（P<0.05）,补肾组、补脾组、西药组组间两两比较,差异皆无统计学意义（P>0.05）。结论:1造模结束后,造模组大鼠不仅处于明显衰老的状态,其学习记忆能力也大幅度下降,说明本实验成功建立了老年健忘动物模型。2固本健脑法、补肾健脑法、补脾健脑法均能在一定程度上改善老年健忘动物的学习记忆功能,但固本健脑法的作用最佳。3老年健忘与AGEs、Aβ1-42激活RAGE/NF-κBp65信号通路,促使大量炎因子（IL-1β、TNF-α等）的表达和释放,引起海马脑区炎症反应有关。固本健脑法能在一定程度上阻滞RAGE/NF-κB信号通路的信号转导过程,下调海马脑区炎性因子的表达,保护海马组织,改善老年健忘动物的学习记忆功能。