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背景与目的小儿慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)是不同病因心脏病发生、发展的共同结局。目前认为CHF的发生机制是心室重塑。新近研究发现细胞外基质(ECM)合成与降解的失衡与心室重塑发生密切相关。而细胞外基质合成与降解的平衡又取决于基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases MMPs)及其组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinases TIMPs)的平衡。坎地沙坦作为一种国内新上市的血管紧张素受体阻滞剂(Angiotensin receptor blockers,ARB),已应用于心衰的临床治疗,取得了较好的疗效。但是,坎地沙坦治疗心衰的具体作用机制尚未完全阐明,其作用是否涉及到MMPs、TIMPs,目前研究较少。本课题拟制作腹主动脉缩窄幼鼠心衰模型,旨在观察MMP—9、TIMP—1在心衰幼鼠心肌中的表达,以探明其在心室重塑中的确切作用,并用坎地沙坦干预,观察其对心室重塑及重塑心肌中MMP—9、TIMP—1表达的影响,以发现坎地沙坦治疗心衰新的作用机制。材料与方法雄性Wistar幼鼠采用肾上腹主动脉缩窄法制作慢性心衰模型,术后5周随机抽取10只幼鼠检测血流动力学参数,证明达到心衰后(LVEDP≥15mmHg),将剩余幼鼠随机分为两组,心衰组(model组)及药物组(candesartan组);另取对照组(sham组)只分离腹主动脉不结扎缝线作为对照。药物组用坎地沙坦0.1mg/kg/d灌胃,对照组、心衰组用生理盐水灌胃,继续喂养4周。9周后再次检测血流动力学参数,用Masson染色法观察左室心肌胶原形态,图像分析测量胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原面积(PVCA),免疫组化法检测心室肌中MMP—9、TIMP—1表达。结果1.模型制作5周后对照组幼鼠一般状态正常,其余两组幼鼠出现明显心衰表现;行药物干预4周后,心衰组与药物组比较,后者心衰表现明显减轻,前者更加严重。2.模型制作9周后各组幼鼠LVEDP(mmHg)、+dp/dtmax(mmHg/s)、-dp/dtmax(mmHg/s)分别为:①对照组:5.57±1.10,5632.68±667.06,4149.80±693.40;②心衰组:21.70±4.52,3965.07±637.53,2957.47±560.64;③药物组:8.60±1.64,5043.09±581.33,3848.97±524.25。对照组幼鼠LVEDP较心衰组为低(p<0.01),而后者又比药物组高(p<0.01)。说明了心衰模型制作成功,用药物干预后心衰较前明显好转。+dp/dtmax、-dp/dtmax心衰组幼鼠较对照组为低(p<0.01),而药物组又比前者升高(p<0.05),说明了经坎地沙坦治疗后幼鼠心功能得到改善。3.模型制作9周后各组幼鼠的血流动力学指标,收缩压(mmHg、舒张压(mmHg)及平均动脉压(mmHg)各组幼鼠分别为:①对照组:121.25±9.65,81.00±6.93,94.54±7.59;②心衰组:104.50±6.44,71.13±6.92,82.96±6.64;③药物组:96.89±7.94,65.89±7.51,76.11±7.86。对照组幼鼠收缩压、舒张压及平均动脉压均较心衰组为高,差异有统计学意义(p<0.05),心衰组比药物组稍高,但差异无统计学意义(p>0.05)。说明了心衰后幼鼠血压较正常组低,而经坎地沙坦治疗后,血压有轻微下降。4.模型制作9周后LVMI、CVF、PVCA在sham组幼鼠分别为:①对照组:1.58±0.32,3.31±0.38,0.36±0.16;②心衰组为:2.60±0.45,5.97±0.83,1.33±0.40;③药物组为:2.13±0.41,4.05±0.68,0.88±0.28。心衰组幼鼠各指标明显高于对照组(P<0.01);而与心衰组比较,药物组显著降低(P<0.05)。说明心衰组幼鼠心衰形成后心肌间质中纤维胶原沉积较多,心室重塑明显,而经药物作用后,明显改善心室重塑。5.免疫组织化学检测表明,MMP—9、TIMP—1主要在心肌细胞胞浆内表达。MMP—9、TIMP—1、MMP—9/TIMP—1比值在各组幼鼠心肌中分别为:①对照组:45.47±11.15,36.30±5.81,1.28±0.37;②心衰组:66.49±8.89,26.84+5.42,2.56±0.58;③药物组:53.12±10.71,34.50±7.40,1.63±0.55。MMP—9在sham组幼鼠心肌细胞表达较弱,在心衰组强阳性表达,而药物组幼鼠心肌中其表达较弱,两组相比差别有统计学意义(p<0.05)。TIMP—1在心衰组幼鼠心肌细胞表达较对照组、药物组明显减弱,差别有统计学意义(p<0.05)。MMP—9/TIMP—1比值在心衰组幼鼠明显高于对照组、药物组,差别有统计学意义(p<0.01)。说明MMP—9/TIMP—1系统相互作用的失衡与心室重塑有关,经4周坎地沙坦治疗,可能通过恢复MMP—9/TIMP—1的比例平衡,改善心室重塑和心功能。结论1.MMP—9/TIMP—1相互作用的失衡参与了压力负荷心衰幼鼠心室重塑的发病机制;2.坎地沙坦改善心室重塑可能与其调节MMP—9、TIMP—1的表达,恢复MMP—9/TIMP—1系统相互作用的平衡有关;3.降低MMPs表达可能是未来治疗心力衰竭的新方法。