LncRNA TUG1 在肾透明细胞癌中表达及临床意义的研究

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目的:影响肾透明细胞癌治疗及预后的主要因素是肿瘤的转移,而目前对肾癌的转移机制尚不明确。Lnc RNA TUG1(牛磺酸调节基因1)是一个表达在视网膜和大脑的长链非编码RNA。最新研究显示Lnc RNA TUG1在膀胱癌、胃癌、直肠癌、神经胶质瘤、骨肉瘤等肿瘤的发生发展中发挥重要作用。本实验研究具体探讨Lnc RNA TUG1在肾透明细胞癌(cc RCC)及癌旁正常组织中的表达水平,分析Lnc RNA TUG1在cc RCC中的表达水平与临床病理特质及预后的相关联系,并深入探讨其在cc RCC发病进展中所起的作用机制,为cc RCC的早期无创诊断、精准医疗及随访预测提供研究基础。方法:深圳市第二人民医院生物样本库中随机抽取40例cc RCC及配对的距肿瘤组织2cm之外的正常肾组织。提取实验样本总RNA并通过逆转录获得c DNA,利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测Lnc RNA TUG1在组织样本、四株肾癌细胞系及肾小管正常上皮细胞HK-2中的表达量,利用统计学分析Lnc RNA TUG1表达量与临床病理特征之间的联系。利用RT-PCR技术检测A704、A498、786-0和ACHN四种不同转移潜能肾癌细胞系中Lnc RNA TUG1的表达水平。挑选出高表达的两株肾癌细胞系A704、A498。通过构建si RNA载体,研究干涉沉默Lnc RNA TUG1对肾癌细胞系A704、A498的生长、凋亡、侵袭及迁移等生物学行为的影响,通过CCK-8细胞增殖-毒性检测试剂盒来检测细胞生长情况,再用划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验来检测细胞侵袭能力,为肾癌的早期诊断和精准治疗提供新的方法和思路。结果:(1)40对肾透明细胞癌样本中31例(77.5%)Lnc RNA TUG1表达上调,cc RCC组织中Lnc RNA TUG1表达水平显著高于配对癌旁组织(P<0.01);(2)Lnc RNA TUG1表达水平与患者的性别(P=0.694)、年龄(P=0.457)、肿瘤分期(P=1.000)、AJCC分期(P=0.453)及远处淋巴结转移(P=1.000)无明显相关性。而Lnc RNA TUG1表达水平与患者肿瘤大小(P=0.003<0.05)及福尔曼分级(P=0.001<0.05)有显著相关性;(3)通过体外干扰沉默Lnc RNA TUG1后,肾癌细胞系A704、A498细胞增殖明显降低,细胞侵袭能力明显下降,细胞凋亡明显增加。结论:(1)在cc RCC组织中,Lnc RNA TUG1的表达水平相比正常肾组织中明显上升,提示Lnc RNA TUG1表达升高可能与肾癌的发病、进展相关,临床上检测Lnc RNA TUG1的表达量可能有利于cc RCC的早期诊断;(2)Lnc RNA TUG1的表达水平与肿瘤大小、福尔曼分级相关,提示其可用来预测肿瘤的TNM分期及肿瘤恶性程度;(3)Lnc RNA TUG1可能是肾癌发展发展中起重要作用的癌基因,通过抑制Lnc RNA TUG1的表达或许将成为肾癌精准治疗的新手段。目的:提高对睾丸恶性间质细胞瘤(TMLCT)临床病理特征的认识及无创诊断水平方法:回顾分析1例TMLCT的临床病理资料,检测患者外周血循环肿瘤细胞(CTC)并进行文献复习结果:全麻下行根治性右睾丸肿瘤切除术。术后病理检查显示:睾丸恶性间质细胞瘤,以间质细胞为主,可疑脉管癌栓。免疫组化染色示:α-inhibin(+),vimentin部分(+),EMA(+),PLAP(+),CD30(+),Ki67约5%(+),CK(-),CK7(-),S100(-),CD10(-),SMA(-),Des(-),AFP(-),HCG(-),CEA(-)CK19(-),CD117(-),Oct-4(-),LCA(-),CD20(-),Pax-5(-),CD3(-),CD43(-)。患者外周血中共检测到2个CTCs。术后复查因多发淋巴结转移行化疗3程,随后复查CT见腹膜后淋巴结转移无明显缩小,予行腹膜后肿物切除+冷冻消融术。随访8个月复查CT见腹膜后转移淋巴结较前增大并肾上腺转移结论:TMLCT是极罕见的性索间质肿瘤,恶性度高,预后差,而CTC有望用于其早期诊断及预后预测。
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