【摘 要】
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设计含有与ERG6基因两侧序列同源的长引物,以质粒pBlue-Kan为模板进行PCR扩增,构建含有Cre/loxP系统的酿酒酵母ERG6基因敲除组件。将基因敲除组件转化至酿酒酵母(Saccharomyce
【基金项目】
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陕西省13115项目(K330021003)
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设计含有与ERG6基因两侧序列同源的长引物,以质粒pBlue-Kan为模板进行PCR扩增,构建含有Cre/loxP系统的酿酒酵母ERG6基因敲除组件。将基因敲除组件转化至酿酒酵母(Saccharomyce cerevisi-ae)AD1-8,通过同源重组的方式使目的基因缺失,获得为loxP-Kan-loxP序列组件所替换而产生Kanr的阳性克隆子。然后再将质粒pHis-Cre转入阳性克隆子表达Cre重组酶敲除筛选标记,成功获得酿酒酵母ERG6基因缺失的突变株,并命名为AD1-8-δ。
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