【摘 要】
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目的:构建在大肠杆菌中表达重组人神经型一氧化氮合酶的高表达系统.方法:用PCR方法从cD-NA中扩增目的编码基因,然后将编码基因连接入表达载体pCWori+,将重组的质粒转染入大肠
【机 构】
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暨南大学医学院生物化学教研室,日本国姬路工业大学大学院理学部生命科学院
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目的:构建在大肠杆菌中表达重组人神经型一氧化氮合酶的高表达系统.方法:用PCR方法从cD-NA中扩增目的编码基因,然后将编码基因连接入表达载体pCWori+,将重组的质粒转染入大肠杆菌BL21进行蛋白高表达,经Westem blot确认表达后,进行大量培养,通过层析方法精制此酶,并用吸收光谱法对酶的性质进行测定.结果:从该表达系统中可以获得3 mg/L培养基的高产量的一氧化氮合酶.结论:从该表达系统中可获得大量有活性的人一氧化氮合酶.
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