RNA干扰CA916798基因真核表达载体的构建与鉴定

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：JK0803_chenjianchao

【摘要】

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目的构建CA916798基因RNA干扰（RNAi）的真核细胞表达载体。方法以CA916798为靶基因，以pGenSil-1质粒为载体，设计构建重组体，根据GenBank数据库提供的CA916798基因核苷酸序列，按照Tus

【作者】

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王海晶杨和平周向东

【机构】

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第三军医大学西南医院呼吸内科

【出处】

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第三军医大学学报

【发表日期】

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2008年1期

【关键词】

：

CA916798 RNA干扰真核表达载体构建转染 CA916798 RNA interference eukaryotic expression ve

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目的构建CA916798基因RNA干扰（RNAi）的真核细胞表达载体。方法以CA916798为靶基因，以pGenSil-1质粒为载体，设计构建重组体，根据GenBank数据库提供的CA916798基因核苷酸序列，按照Tuschl设计原则，选择设计2条带发夹结构的核苷酸序列，克隆到空载体pGenSil-1中，转化DH5et菌株，提取质粒，进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析。用脂质体2000将重组质粒转染A549／CDDP细胞并用G418筛选，MTT法测定药物敏感性并绘制细胞增殖曲线。结果构建针对CA9167

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