【摘 要】
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采用RT-PCR法从矮化黄瓜D0462中分离膨胀素基因Cs-EXPA1,并将其与毕赤酵母分泌型表达载体pGAPHαM连接,形成重组质粒pGAPHαM-EXPA1。通过电击转化法将重组质粒转化到巴氏德
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采用RT-PCR法从矮化黄瓜D0462中分离膨胀素基因Cs-EXPA1,并将其与毕赤酵母分泌型表达载体pGAPHαM连接,形成重组质粒pGAPHαM-EXPA1。通过电击转化法将重组质粒转化到巴氏德毕赤酵母GS115中,经检测膨胀素基因通过同源重组整合到毕赤酵母染色体上,成功获得重组菌株。该菌株在摇床培养条件下可在上清液中检测到膨胀素蛋白。该蛋白不具有单独水解纤维素的活性,但在纤维素酶水解纤维素时却具有协同水解纤维素的活性。文章初步确定膨胀素协同水解纤维素的最佳时间36 h、最适pH 4.0~5.0、最适温度50℃。研究可为提高纤维素的酶水解效率提供理论参考。
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