【摘 要】
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目的 探讨健脾化瘀解毒方(JPHY)调控PI3K/Akt/HIF-1 α通路干预胃癌前病变(GPL)大鼠胃黏膜上皮细胞自噬及凋亡的机制.方法 采用200 μg· mL-1N-甲基-N\'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)自由饮用+隔日禁食法造模28周复制GPL模型.将SD大鼠随机均分为空白组、模型组、维酶素组(270 mg·kg-1)、JPHY高剂量组(9 g·kg-1)和JPHY低剂量组(4.5 g·kg-1),每组18只.第15周起,各给药组大鼠每天灌胃给药(10 mL·kg-1)1次,连续25周.
【机 构】
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广州中医药大学第五临床医学院,广东广州510095;广东省第二中医院(广东省中医药工程技术研究院),广东广州510095;广东省中医药研究开发重点实验室,广东广州510095;广东省第二中医院(广东省
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目的 探讨健脾化瘀解毒方(JPHY)调控PI3K/Akt/HIF-1 α通路干预胃癌前病变(GPL)大鼠胃黏膜上皮细胞自噬及凋亡的机制.方法 采用200 μg· mL-1N-甲基-N\'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)自由饮用+隔日禁食法造模28周复制GPL模型.将SD大鼠随机均分为空白组、模型组、维酶素组(270 mg·kg-1)、JPHY高剂量组(9 g·kg-1)和JPHY低剂量组(4.5 g·kg-1),每组18只.第15周起,各给药组大鼠每天灌胃给药(10 mL·kg-1)1次,连续25周.分别于第18、28和39周,每组随机取6只大鼠,采用HE染色法观察大鼠胃黏膜组织病理学形态变化;Western Blot法测定胃黏膜组织PI3K、Akt、HIF-1α、Beclin1、Bcl-2、BAX蛋白的表达.结果 与空白组比较,模型组大鼠胃黏膜组织固有腺变薄,非固有腺锯齿样变,弥漫性细胞空泡样变,固有腺细胞变为体积小、胞质少、核质比例大、深染的异型增生细胞,呈假复层、跨腺腔灶状分布,有炎性细胞浸润,表现为以肠上皮化生为主;第18周,大鼠胃黏膜组织的PI3K、Akt蛋白表达明显下调(P＜0.05,P＜0.01),HIF-1α、Beclin1、Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显上调(P＜0.05,P＜0.01);第28周,PI3K、Akt、BAX蛋白表达明显下调(P＜0.05,P＜0.01),HIF-1α、Beclin1蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显上调(P＜0.01);第39周,Akt蛋白表达明显下调(P＜0.05),HIF-1α、Beclin1、Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显上调(P＜0.05,P＜0.01),PI3K、BAX蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).与模型组比较,JPHY高剂量组的胃黏膜改善作用最明显,异型增生细胞数量、分布范围和分布密度有明显减少,固有层厚度明显增加,腺腔结构趋于正常;第18周的PI3K、Akt蛋白表达明显上调(P＜0.01),HIF-1α、Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显下调(P＜0.05);第28周的PI3K、Akt、BAX蛋白表达明显上调(P＜0.05,P＜0.01),HIF-1α、Beclin1蛋白表达及Bcl-2/BAX比值表达明显下调(P＜0.01);第39周Akt蛋白表达明显上调(P＜0.01),HIF-1α、Beclin1蛋白表达及Bcl-2/BAX比值明显下调(P＜0.05,P＜0.01).结论 JPHY对GPL不同阶段的黏膜损伤均有明显保护作用,可能与其通过PI3K/Akt/HIF-1α通路调节肿瘤缺氧微环境以及调控细胞自噬、凋亡作用有关.
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