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研究树突状细胞共培养的细胞因子诱导的杀伤细胞(dendritic cell co-cultured cytokine-induced killer cells, DC-CIK)联合索拉菲尼对肺腺癌细胞A549(KRAS基因突变型)和PC-9(EGFR基因突变型)的抗瘤效应及其机制。
方法从肺癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中常规诱导DC与CIK，1周后共培养，收集第7天DC-CIK，流式细胞术(FCM)分析其表型。MTT法检测索拉菲尼对肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)。以DC-CIK和/或索拉菲尼处理肿瘤细胞，CCK-8法和实时无标记细胞分析技术(real-time cellular analysis，RTCA)分别检测和动态监测肿瘤细胞的增殖情况；Annexin-V/PI双染法检测凋亡率。实时荧光定量PCR及FCM分别检测索拉菲尼作用24 h后自然杀伤细胞活化性配体(NKG2DLs)的mRNA和蛋白表达。
结果索拉菲尼对A549和PC-9作用24 h的IC50差异无统计学意义(P>0.05)。联合组中的增殖抑制率和总凋亡率显著高于单一因素组，且增殖抑制率随效靶比增加而提高(P<0.05)；而联合组中的标准化细胞指数明显低于单一因素组。NKG2D封闭可以减弱DC-CIK的增殖抑制作用(P<0.05)。5 μmol/L索拉菲尼作用24 h后，肿瘤细胞中NKG2DLs(ULBP1、UBLP2、ULBP3)的mRNA和蛋白质的表达量均有不同程度增加。
结论索拉菲尼对KRAS基因突变型和EGFR基因突变型肺腺癌细胞的增殖抑制作用差异无统计学意义；DC-CIK联合索拉菲尼对肿瘤细胞的抗瘤作用明显优于单一因素，可能是通过调节NKG2D-NKG2DLs通路和凋亡诱导作用实现的。