丝瓜ISSR—PCR反应体系的建立

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以丝瓜为试材,研究了ISSR—PCR反应体系的主要成分及退火温度、循环次数对丝瓜ISSR扩增结果的影响。结果表明:在20止的反应体系中,Mg^2+的用量为2mmol/L,dNTPs浓度为0.2mmol/L,引物的浓度为0.6wmol/L,Taq DNA聚合酶的用量为1U,模板DNA的用量为30ng,在适当的退火温度下,35个循环能得到清晰、多态性高的ISSR带谱。
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