【摘 要】
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目的 分离和鉴定采自徐州自然感染奶牛粪便中的隐孢子虫卵囊.方法 在徐州某奶牛场采集经改良抗酸染色镜检确认为隐孢子虫感染的奶牛粪便,用不连续Sheathers蔗糖密度梯度离心
【机 构】
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中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,徐州医学院
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目的 分离和鉴定采自徐州自然感染奶牛粪便中的隐孢子虫卵囊.方法 在徐州某奶牛场采集经改良抗酸染色镜检确认为隐孢子虫感染的奶牛粪便,用不连续Sheathers蔗糖密度梯度离心法纯化卵囊.采用Chelex-100方法提取卵囊基因组DNA,设计引物扩增小亚基核糖体RNA(SSU rRNA)基因和卵囊囊壁蛋白(COWP)基因,分别克隆到pGEM-T和pGEM-T Easy载体,测定核苷酸序列,运用BLAST和MEGA软件进行序列同源性和种系发生分析.结果 分离的隐孢子虫卵囊个体大小为(7.4±0.32)μm×(5.4±0.21)μm,长宽比为1.37±0.07(n=20).徐州牛源隐孢子虫与GenBank公布的安氏隐孢子虫比较,SSU rRNA和COWP基因序列同源性分别为100%和99%.种系发生分析显示该株隐孢子虫与安氏隐孢子虫处于同一分支.结论 由徐州自然感染奶牛粪便中分离获得的隐孢子虫是安氏隐孢子虫.
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