论文部分内容阅读
【摘 要】 目的：研究清肺保元胶囊的镇痛抗炎作用。方法：采用小鼠扭体实验法与大鼠棉球肉芽肿实验相结合的实验方法，采用SPSS分析软件对实验结果进行数据分析。结果：清肺保元胶囊高、中、低剂量组给药后，可以减少冰醋酸导致小鼠扭体的反应频次以及抑制棉球致大鼠肉芽组织增生，各组实验与空白实验组比较，具有明显的统计学意义（P<0.05，P<0.01）。结论：清肺保元胶囊具有明显的镇痛抗炎作用。
【关键词】 清肺保元胶囊;抗炎作用;镇痛作用;扭体反应;小鼠;大鼠
【中图分类号】R285.5 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2021）08-0023-03
Abstract：Objective To study the analgesic and anti-inflammatory effects of Qingfei Baoyuan capsule.Methods The experimental results were analyzed using SPSS software， which combined the experimental method of twisting body in mice with the experimental method of cotton ball granuloma in rats.Results After the administration of Qingfei Baoyuan capsule in the high， medium and low dose groups， the response frequency of writhing induced by glacial acetic acid in mice and the inhibition of granulation tissue hyperplasia induced by cotton balls in rats could be reduced.The comparison between the experimental groups and the blank experimental group showed significant statistical significance （P<0.05，P<0.01）.Conclusion Qingfei Baoyuan capsule has obvious analgesic and anti-inflammatory effects.
Key words：Qingfei Baoyuan Capsule;Anti-inflammatory Effects; Analgesic Effect; Torsion Body Reaction; Mice; The Rat
清肺保元膠囊是根据贵州中医药大学第一附属医院呼吸内科临床常用经验方清肺保元汤研制而成，由紫花地丁、桑白皮、茯苓等15味药组成，具有清热化痰、宣肺止咳、活血化淤、利水消肿的功效。经过近二十年的临床疗效观察，该方在治疗“脾肾阳虚、痰浊阻肺、痰热蕴肺”的各种慢性阻滞性肺病（中医症见：咳嗽、痰多、胸中憋闷、喘息、动则加剧、心慌心悸、脉浮而滑等）疗效显著，对慢性阻滞性肺病等呼吸系统疾病具有较好的治疗作用，至今未发现不良反应和毒副作用[1-2]。
本实验拟采用小鼠扭体实验法与大鼠棉球肉芽肿实验相结合的实验方法，对清肺保元胶囊的镇痛抗炎作用进行实验研究，为该药的进一步开发利用提供实验依据。
1 材料
1.1 动物无特定病源体 大鼠（SPF级SD大鼠），雌雄各半，体重180～220 g;SPF级昆明小鼠（KM小鼠），雌雄各半，体重18～22 g，长沙市天勤生物技术有限公司，合格证号：SCXK（湘）2016-0012。
1.2 药物 清肺保元胶囊（批号：20181108，贵州中医药大学第一附属医院）;阿司匹林肠溶片（批号：180526，合肥久联制药有限公司）。
1.3 试剂 冰醋酸（批号：20180221，成都市科龙化工试剂厂）。
1.4 仪器 JM-B型电子天平（精度0.01 g，余姚市纪铭称重校验设备有限公司）;ALC-210.3型电子天平（精度1 mg，上海良平仪器仪表有限公司）; ACE101-150数显游标卡尺（东莞市塘厦易测电子仪器厂）。
2 方法
2.1 醋酸致小鼠扭体实验[3] 取KM小鼠60只，雌雄各半，体重18～22 g，随机分成空白对照组，清肺保元胶囊高、中、低剂量组（1760.0、880.0、440.0 mg/kg），阳性药组（阿司匹林，100.0 mg/kg），每组12只小鼠。灌胃给药，给药剂量20 mL/kg，每天一次，连续给药7 d，空白对照组给予等量生理盐水。末次给药1 h后，各鼠均腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 mL/只，随即观察并记录动物15 min内扭体反应次数（次/15 min）。
2.2 大鼠棉球肉芽肿实验[4] 取SD大鼠70只，雌雄各半，体重180～220 g，采用水合氯醛麻醉后，在大鼠前肢左腋窝处消毒、切小口，植入经消毒处理的30 mg干棉球一个，缝合。第2 d，将造模成功的大鼠（棉球未露出）随机分成空白对照组，清肺保元胶囊高、中、低剂量组（1232.0、616.0、308.0 mg/kg），阳性药组（阿司匹林，350.0 mg/kg），每组12只大鼠。灌胃给药，给药剂量10 mL/kg，每天一次，连续给药14 d。末次给药后1 h，脱颈椎处死动物。
计算方法：取出左腋窝中的棉球及其周围的肉芽组织，精密称重，此重量减去棉球重量即为肉芽湿重;将称重后的棉球和肉芽放入60 ℃烘箱中干燥12 h，称重，此重量与棉球原重之差为肉芽肿干重。 2.3 统计学处理 采用SPSS 17.0软件，结果以均数加减标准差（x±s）表示，采用单因素方差分析对各实验组数据均值进行比较，采用LSD检验进行两两比较，P<0.05表示差异有统计学意义。
3 结果
3.1 清肺保元胶囊对醋酸致小鼠扭体反应的影响 由表1可知，在冰醋酸致小鼠扭体实验中，清肺保元胶囊各给药剂量组，可以明显的减少实验小鼠的扭体反应次数，其中以中剂量给药组减少最为明显，与空白组相比较具有统计学意义（P<0.01）。
3.2 清肺保元胶囊对大鼠棉球肉芽肿的影响 由表2可知，在大鼠棉球肉芽肿实验中，清肺保元胶囊各给药剂量组可以明显降低大鼠腋下肉芽组织的湿重与干重，以高剂量组效果最为明显，与空白组比较具有统计学意义（P<0.01）。
4 讨论
肺部疾病在临床上的表现常常以咳嗽或喘息为主，其病症属于中医的“咳嗽”、“喘证”“痰饮”等范畴[5]。“肺之令人咳”（《素问·咳论》）、“肺为咳”（《素问·宣明五气》）均指出呼吸系统疾病的表现以咳嗽为主，在治疗上以止咳为要。传统中医药在治疗呼吸系统疾病方面具有多环节、多靶点的整体调节的优势。遵循中医辨证论治的原则，将若干单味中药组成复方，并将其分为君、臣、佐、使，通过有机的配伍，使各药之间充分的相互作用、各司其职，发挥出不可分割的整体作用。
镇痛药常用的致痛方法概括有物理法与化学法[6]，而醋酸扭体法是化学法中的代表性实验方法，它通过观察实验动物在敏感位置因化学物质致痛后，实验药物对动物扭体表现的影响，来评价药物的镇痛效果。炎症是机体血管系统对各种致炎因素引起损伤而发生的以防御为主的病理过程，其过程常常伴随有疼痛的表现。因此，实验中采用小鼠扭体实验与大鼠棉球肉芽肿实验相结合的对照实验方法，对清肺保元胶囊的镇痛抗炎作用进行了初步实验研究，发现清肺保元胶囊高、中、低各实验组，均具备一定的抗炎镇痛作用，分别以中剂量组与高剂量组效果最为明显，与空白组比较具有明显作用，具有统计学意义（P<0.05、P<0.01）。
清肺保元胶囊在充分中医辨证的基础上，以紫花地丁为君药，配以茯苓、当归、法半夏等组成，以清肺燥，滋肾源、止咳嗽为主，组方上体现了中医金水相生的内涵，药理研究[7]也证实紫花地丁具有明显的抗炎作用。綜上，清肺保元胶囊具有明显的镇痛抗炎效果，在符合中医辨证论治特点的基础上，开展现代药理研究值得在今后的研究中做进一步探讨。
参考文献
[1]胡万福，张建玲，刘丽.清肺保元胶囊中紫花地丁、茯苓及当归的薄层色谱鉴别[J].中医学报，2014，29：22.
[2]吴俣，刘良丽.清肺保元胶囊治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者临床观察[J].贵阳中医学院学报，2017，39（4）：43-46.
[3]李强，陈虹，刘江云，等.复方鹅绒藤凝胶膏剂抗炎镇痛作用研究[J].中国民族民间医药，2018，27（22）：18-21.
[4]张庆华，黄贤华，黄敏，等.金英胶囊镇痛抗炎作用实验研究[J].中医药导报，2016，22（11）：44-46.
[5]刘毅.中医药治疗慢性支气管炎急性发作期概况[J].黑龙江中医药，2013，42（1）：45-47.
[6]李仪奎.中药药理实验方法学[M].2版.上海：科学技术出版社，2006：241-248.
[7]张静，罗燕，乔彦杰，等.紫花地丁不同提取物化学成分检识及抗炎活性研究[J].石河子大学学报（自然科学版），2019，37（1）：121-126.
（收稿日期：2020-10-09 编辑：刘 斌）
【关键词】 清肺保元胶囊;抗炎作用;镇痛作用;扭体反应;小鼠;大鼠
【中图分类号】R285.5 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2021）08-0023-03
Abstract：Objective To study the analgesic and anti-inflammatory effects of Qingfei Baoyuan capsule.Methods The experimental results were analyzed using SPSS software， which combined the experimental method of twisting body in mice with the experimental method of cotton ball granuloma in rats.Results After the administration of Qingfei Baoyuan capsule in the high， medium and low dose groups， the response frequency of writhing induced by glacial acetic acid in mice and the inhibition of granulation tissue hyperplasia induced by cotton balls in rats could be reduced.The comparison between the experimental groups and the blank experimental group showed significant statistical significance （P<0.05，P<0.01）.Conclusion Qingfei Baoyuan capsule has obvious analgesic and anti-inflammatory effects.
Key words：Qingfei Baoyuan Capsule;Anti-inflammatory Effects; Analgesic Effect; Torsion Body Reaction; Mice; The Rat
清肺保元膠囊是根据贵州中医药大学第一附属医院呼吸内科临床常用经验方清肺保元汤研制而成，由紫花地丁、桑白皮、茯苓等15味药组成，具有清热化痰、宣肺止咳、活血化淤、利水消肿的功效。经过近二十年的临床疗效观察，该方在治疗“脾肾阳虚、痰浊阻肺、痰热蕴肺”的各种慢性阻滞性肺病（中医症见：咳嗽、痰多、胸中憋闷、喘息、动则加剧、心慌心悸、脉浮而滑等）疗效显著，对慢性阻滞性肺病等呼吸系统疾病具有较好的治疗作用，至今未发现不良反应和毒副作用[1-2]。
本实验拟采用小鼠扭体实验法与大鼠棉球肉芽肿实验相结合的实验方法，对清肺保元胶囊的镇痛抗炎作用进行实验研究，为该药的进一步开发利用提供实验依据。
1 材料
1.1 动物无特定病源体 大鼠（SPF级SD大鼠），雌雄各半，体重180～220 g;SPF级昆明小鼠（KM小鼠），雌雄各半，体重18～22 g，长沙市天勤生物技术有限公司，合格证号：SCXK（湘）2016-0012。
1.2 药物 清肺保元胶囊（批号：20181108，贵州中医药大学第一附属医院）;阿司匹林肠溶片（批号：180526，合肥久联制药有限公司）。
1.3 试剂 冰醋酸（批号：20180221，成都市科龙化工试剂厂）。
1.4 仪器 JM-B型电子天平（精度0.01 g，余姚市纪铭称重校验设备有限公司）;ALC-210.3型电子天平（精度1 mg，上海良平仪器仪表有限公司）; ACE101-150数显游标卡尺（东莞市塘厦易测电子仪器厂）。
2 方法
2.1 醋酸致小鼠扭体实验[3] 取KM小鼠60只，雌雄各半，体重18～22 g，随机分成空白对照组，清肺保元胶囊高、中、低剂量组（1760.0、880.0、440.0 mg/kg），阳性药组（阿司匹林，100.0 mg/kg），每组12只小鼠。灌胃给药，给药剂量20 mL/kg，每天一次，连续给药7 d，空白对照组给予等量生理盐水。末次给药1 h后，各鼠均腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 mL/只，随即观察并记录动物15 min内扭体反应次数（次/15 min）。
2.2 大鼠棉球肉芽肿实验[4] 取SD大鼠70只，雌雄各半，体重180～220 g，采用水合氯醛麻醉后，在大鼠前肢左腋窝处消毒、切小口，植入经消毒处理的30 mg干棉球一个，缝合。第2 d，将造模成功的大鼠（棉球未露出）随机分成空白对照组，清肺保元胶囊高、中、低剂量组（1232.0、616.0、308.0 mg/kg），阳性药组（阿司匹林，350.0 mg/kg），每组12只大鼠。灌胃给药，给药剂量10 mL/kg，每天一次，连续给药14 d。末次给药后1 h，脱颈椎处死动物。
计算方法：取出左腋窝中的棉球及其周围的肉芽组织，精密称重，此重量减去棉球重量即为肉芽湿重;将称重后的棉球和肉芽放入60 ℃烘箱中干燥12 h，称重，此重量与棉球原重之差为肉芽肿干重。 2.3 统计学处理 采用SPSS 17.0软件，结果以均数加减标准差（x±s）表示，采用单因素方差分析对各实验组数据均值进行比较，采用LSD检验进行两两比较，P<0.05表示差异有统计学意义。
3 结果
3.1 清肺保元胶囊对醋酸致小鼠扭体反应的影响 由表1可知，在冰醋酸致小鼠扭体实验中，清肺保元胶囊各给药剂量组，可以明显的减少实验小鼠的扭体反应次数，其中以中剂量给药组减少最为明显，与空白组相比较具有统计学意义（P<0.01）。
3.2 清肺保元胶囊对大鼠棉球肉芽肿的影响 由表2可知，在大鼠棉球肉芽肿实验中，清肺保元胶囊各给药剂量组可以明显降低大鼠腋下肉芽组织的湿重与干重，以高剂量组效果最为明显，与空白组比较具有统计学意义（P<0.01）。
4 讨论
肺部疾病在临床上的表现常常以咳嗽或喘息为主，其病症属于中医的“咳嗽”、“喘证”“痰饮”等范畴[5]。“肺之令人咳”（《素问·咳论》）、“肺为咳”（《素问·宣明五气》）均指出呼吸系统疾病的表现以咳嗽为主，在治疗上以止咳为要。传统中医药在治疗呼吸系统疾病方面具有多环节、多靶点的整体调节的优势。遵循中医辨证论治的原则，将若干单味中药组成复方，并将其分为君、臣、佐、使，通过有机的配伍，使各药之间充分的相互作用、各司其职，发挥出不可分割的整体作用。
镇痛药常用的致痛方法概括有物理法与化学法[6]，而醋酸扭体法是化学法中的代表性实验方法，它通过观察实验动物在敏感位置因化学物质致痛后，实验药物对动物扭体表现的影响，来评价药物的镇痛效果。炎症是机体血管系统对各种致炎因素引起损伤而发生的以防御为主的病理过程，其过程常常伴随有疼痛的表现。因此，实验中采用小鼠扭体实验与大鼠棉球肉芽肿实验相结合的对照实验方法，对清肺保元胶囊的镇痛抗炎作用进行了初步实验研究，发现清肺保元胶囊高、中、低各实验组，均具备一定的抗炎镇痛作用，分别以中剂量组与高剂量组效果最为明显，与空白组比较具有明显作用，具有统计学意义（P<0.05、P<0.01）。
清肺保元胶囊在充分中医辨证的基础上，以紫花地丁为君药，配以茯苓、当归、法半夏等组成，以清肺燥，滋肾源、止咳嗽为主，组方上体现了中医金水相生的内涵，药理研究[7]也证实紫花地丁具有明显的抗炎作用。綜上，清肺保元胶囊具有明显的镇痛抗炎效果，在符合中医辨证论治特点的基础上，开展现代药理研究值得在今后的研究中做进一步探讨。
参考文献
[1]胡万福，张建玲，刘丽.清肺保元胶囊中紫花地丁、茯苓及当归的薄层色谱鉴别[J].中医学报，2014，29：22.
[2]吴俣，刘良丽.清肺保元胶囊治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者临床观察[J].贵阳中医学院学报，2017，39（4）：43-46.
[3]李强，陈虹，刘江云，等.复方鹅绒藤凝胶膏剂抗炎镇痛作用研究[J].中国民族民间医药，2018，27（22）：18-21.
[4]张庆华，黄贤华，黄敏，等.金英胶囊镇痛抗炎作用实验研究[J].中医药导报，2016，22（11）：44-46.
[5]刘毅.中医药治疗慢性支气管炎急性发作期概况[J].黑龙江中医药，2013，42（1）：45-47.
[6]李仪奎.中药药理实验方法学[M].2版.上海：科学技术出版社，2006：241-248.
[7]张静，罗燕，乔彦杰，等.紫花地丁不同提取物化学成分检识及抗炎活性研究[J].石河子大学学报（自然科学版），2019，37（1）：121-126.
（收稿日期：2020-10-09 编辑：刘 斌）