【摘 要】
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目的 探讨以miRNA-214为靶点的反义核酸对白血病U937细胞的生长抑制作用及可能的作用机制.方法 人工合成miRNA-214的反义核酸序列,硫代修饰,以Lipofectamine 2000为介导转入U
【机 构】
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广东省湛江市中心医院检验科,深圳市宝安区观澜人民医院检验科
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目的 探讨以miRNA-214为靶点的反义核酸对白血病U937细胞的生长抑制作用及可能的作用机制.方法 人工合成miRNA-214的反义核酸序列,硫代修饰,以Lipofectamine 2000为介导转入U937细胞.MTT细胞毒性检测U937细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞的凋亡水平,荧光定量PCR 检测miRNA-214的表达水平.结果 MTT检测结果显示,转染反义核酸后24、48、72 h,U937细胞的增殖活性显著下降(0.812±0.001、0.770±0.002、0.541±0.001),与随机对照组(1.011±0.002、1.112±0.003、1.111 ±0.003)、空白对照组(1.112±0.001、1.023±0.001、1.101±0.001)相比较差异均有统计学意义( F=2.782、3.659、2.735,P=0.021、0.018、0.036).流式细胞术检测结果表明,在转染反义核酸48 h后细胞的凋亡水平随时间延长而提高(48、72 h分别为15.12±0.02、19.14±0.01),与随机对照组(2.04±0.02、2.45±0.03)、空白对照组(1.19±0.02、2.02±0.01)相比较差异均有统计学意义(F=3.683、3.762,P=0.013、0.015).荧光定量PCR结果证实,在反义核酸作用后,U937细胞内miRNA-214的相对表达水平明显下降(31.1±0.2),与随机对照组、空白对照组的25.8±0.1、25.6±0.2相比较,差异均有统计学意义(均P＜ 0.05).结论 以miRNA-214为靶点的反义核酸可抑制U937细胞的增殖活性,并明显促进细胞的凋亡.
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