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D-氨基酸氧化酶(DAAO)在转化头孢菌素C生产7-ACA和转化DL-氨基酸制备α-酮酸和L-氨基酸上起着重要的作用。采用DNA操作技术,将来源于三角酵母的DAAO基因连接至表达载体pPIC3.5K上,再将表达质粒pPIC3.5K-DAAO分别整合P.pastoris的宿主细胞KM71和GS115,经筛选获得阳性重组菌PDK13(Mut^s)和PD27(Mut^*)。重点对两种突变菌的表达条件进行了比较。结果显示:PDK13(Mut^s)株比PD27(Mut^*)株消耗甲醇慢、诱导时间长,但对通气量要求低