【摘 要】
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目的:探究肿瘤相关中性粒细胞（tumor associated neutrophil, TAN）对子宫内膜癌（endometrial cancer, EC）进展的影响，并初步研究相关的分子机制。方法:免疫组织化学染色检测15例子宫内膜癌患者肿瘤组织及癌旁组织内半乳糖凝集素9（Galectin-9）及其受体T细胞免疫球蛋白结构域分子3（Tim-3）、TAN的表达，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）
【基金项目】
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海南省卫生健康行业科研项目（编号：19A200184）；
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目的:探究肿瘤相关中性粒细胞（tumor associated neutrophil, TAN）对子宫内膜癌（endometrial cancer, EC）进展的影响，并初步研究相关的分子机制。方法:免疫组织化学染色检测15例子宫内膜癌患者肿瘤组织及癌旁组织内半乳糖凝集素9（Galectin-9）及其受体T细胞免疫球蛋白结构域分子3（Tim-3）、TAN的表达，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Western blot检测组织内Galectin-9与Tim-3在mRNA和蛋白上的表达水平；从患者血液中分离TAN细胞，通过瑞士-吉姆萨染液染色和流式细胞术进行鉴定；建立人子宫内膜癌Ishikawa细胞与TAN细胞共培养体系，并用Tim-3/Galectin-9信号竞争性拮抗剂α-lactose或rh GAL-9培养Ishikawa细胞，CCK-8检测Ishikawa细胞增殖活性，Transwell法检测细胞迁移与侵袭能力，体外血管生成实验检测细胞血管生成情况，免疫荧光染色检测细胞内Galectin-9与Tim-3的荧光表达。结果:子宫内膜癌组织内Galectin-9和Tim-3均呈高表达，且存在中性粒细胞浸润现象;从患者血液中成功分离到TAN;Ishikawa细胞与TAN细胞共培养后，Ishikawa细胞增殖活性升高，迁移数目与侵袭数目均增加，形成血管的管道分支数目增加，Galectin-9与Tim-3的平均光密度值升高（P <0.01）;在Ishikawa细胞与TAN细胞共培养体系中添加40 μmol/Lα-lactose处理后，Ishikawa细胞增殖活性下降，迁移数目与侵袭数目均减少，血管管道分支数目也减少，Galectin-9与Tim-3的平均光密度值降低（P <0.01）;而在Ishikawa细胞与TAN细胞共培养体系中添加2.0μg/m L rh GAL-9作用后，Ishikawa细胞增殖活性升高，迁移数目与侵袭数目均明显增加，血管管道分支数目增加，同时，Galectin-9与Tim-3的平均光密度值升高（P <0.01）。结论:肿瘤相关中性粒细胞能够提高子宫内膜癌细胞增殖活性，促进肿瘤细胞的迁移、侵袭以及血管生成，其分子机制可能与调控Galectin-9及其受体Tim-3表达相关。
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