人GRP94基因慢病毒载体构建及稳定表达GRP94蛋白的人宫颈癌HeLa细胞株筛选及鉴定

来源 :天津医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiangjiao610329
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目的:构建人葡萄糖调节蛋白94(GRP94)基因慢病毒载体,筛选稳定表达GRP94蛋白的人宫颈癌细胞株,筛选GRP94结合蛋白,为探讨GRP94对宫颈癌的调控作用提供细胞模型。方法:采用RT-PCR法从He La细胞中扩增GRP94基因片段,连接到慢病毒载体p LVX-IRES-Puro中,获得重组载体。瞬时转染293T细胞,采用Western blot法检测GRP94蛋白表达量。p LVX-FLAGGRP94重组质粒通过与包装质粒共转染293T细胞,获得重组慢病毒。以慢病毒感染He La细胞,筛选并鉴定
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