论文部分内容阅读
目的:研究参莲（SL）提取物在脂质过氧化炎症损伤模型中,对巨噬细胞功能的作用和促进炎症消散的药效和药理机制。方法:利用氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）体外诱导小鼠巨噬细胞RAW264. 7细胞和人单核细胞THP-1造成脂质过氧化损伤模型,酶联免疫吸附测定（ELISA）检测不同质量浓度的SL提取物(2. 5,5. 0,10. 0,20. 0 mg·L-1)对巨噬细胞肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白细胞介素-1β（IL-1β）,单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的含量;流式细胞术检测巨噬细胞泡沫化形成;transwell实验检测SL提取物对THP-1趋化功能的影响;以及用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测诱导型一氧化氮合酶（i NOS）,炎症消散因子5脂氧合酶（ALOX5）以及对核转录因子-κB（NF-κB）信号通路中的磷酸化p65（p-p65）和磷酸化IκK（p-IκK）蛋白表达情况。结果:与正常组比较,ox-LDL提高M1型巨噬细胞标志物TNF-α,IL-1β,i NOS的表达（P <0. 01）,抑制M2型标志物IL-10的表达,促进泡沫细胞形成（P <0. 01）,诱导THP-1向ox-LDL趋化,提高MCP-1分泌量（P <0. 01）,抑制ALOX5的表达。与模型组比较,SL提取物可以降低TNF-α,IL-1β,i NOS的表达（P <0. 01）,提高IL-10的表达（P <0. 05）;能显著降低巨噬细胞吞噬脂质后泡沫化的形成（P <0. 01）;能降低THP-1细胞MCP-1的分泌（P <0. 01）,减少趋化的细胞数目（P <0. 01）;促进炎症消散因子ALOX5的升高（P <0. 05）,同时抑制p65和IκK磷酸化表达（P <0. 01）。结论:在脂质过氧化炎症损伤模型中,SL提取物具有诱导巨噬细胞M2极化,抑制巨噬细胞对ox-LDL的趋化和泡沫化的形成,提高ALOX5表达,促进炎症消散,从而改善脂质过氧化炎症损伤状态,上述功能与抑制NF-κB信号通路中p65和IκK磷酸化水平有关。