【摘 要】
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目的 探讨瞬时感受器电位通道6 （TRPC6） DNA甲基化在同型半胱氨酸致胰岛β细胞焦亡中的作用。方法 20只cbs+/-小鼠随机分为2组,每组10只。对照组为正常普通饮食,高蛋氨酸组为高蛋氨酸饮食（普通饮食中加入1.7%蛋氨酸）。采用全自动生化分析仪检测小鼠血糖水平;Western blot检测焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β和TRPC6的表达;qRT-PCR测定胰岛β细
【机 构】
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宁夏医科大学国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金地区项目（82060139,81760139）;国家自然科学基金青年项目（81900273）； 宁夏回族自治区重点研发计划一般项目（2018BEG03026）； 第三批宁夏青年科技人才托举工程项目（TJGC2018010）； 中国科学院西安分院“西部青年学者”项目（XA
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目的 探讨瞬时感受器电位通道6 （TRPC6） DNA甲基化在同型半胱氨酸致胰岛β细胞焦亡中的作用。方法 20只cbs+/-小鼠随机分为2组,每组10只。对照组为正常普通饮食,高蛋氨酸组为高蛋氨酸饮食（普通饮食中加入1.7%蛋氨酸）。采用全自动生化分析仪检测小鼠血糖水平;Western blot检测焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β和TRPC6的表达;qRT-PCR测定胰岛β细胞TRPC6 mRNA表达水平;qRT-PCR和Western blot检测DNMT1、DNMT3a及DNMT3b mRNA和蛋白的表达;采用巢式降落式特异性PCR （nMS-PCR）测验TRPC6 DNA甲基化水平;Pearson相关系数对胰腺组织中TRPC6甲基化水平与血糖以及细胞焦亡水平进行相关性分析。结果 与对照组比较,高蛋氨酸组中cbs+/-小鼠血糖水平明显升高（P<0.01）;NLRP3、Caspase-1以及IL-1β表达水平显著升高（P<0.01）;TRPC6的mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。同时,高蛋氨酸组TRPC6启动子区DNA甲基化水平降低（P<0.01）,DNMT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,而DNMT3a和DNMT3b蛋白表达变化未有统计学意义（P>0.05）;Pearson相关性分析发现TRPC6甲基化水平与血糖水平（r=-0.782 4,P=0.007 5）以及NLRP3 （r=-0.777 5,P=0.008 1）、Caspase-1 （r=-0.899 2,P=0.000 4）、IL-1β（r=-0.669 1,P=0.034 4）蛋白表达均呈负相关。结论 同型半胱氨酸可以诱导胰岛β细胞焦亡的发生,而TRPC6 DNA低甲基化表达可能是Hcy诱导胰岛β细胞焦亡发生的重要机制之一。
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