【摘 要】
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目的克隆、表达大劣按蚊丝氨酸蛋白酶.方法根据已报道昆虫的前酚氧化酶激活酶(prophenoloxidase-activating enzyme,PPAE)的保守氨基酸序列设计简并引物,以大劣按蚊血细胞mRN
【机 构】
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第三军医大学基础部病原生物学教研室
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目的克隆、表达大劣按蚊丝氨酸蛋白酶.方法根据已报道昆虫的前酚氧化酶激活酶(prophenoloxidase-activating enzyme,PPAE)的保守氨基酸序列设计简并引物,以大劣按蚊血细胞mRNA为模板,进行RT-PCR扩增,克隆和测定插入片段;所得序列进行BLAST查询,并原核表达其中的两种PPAE样丝氨酸蛋白酶cDNA,通过SDS-PAGE和Western blotting 检测表达产物.结果和结论获得了3种大劣按蚊血细胞丝氨酸蛋白酶cDNA部分序列,即AdsP1(512bp),AdsP2
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