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摘 要：采用随机区组设计，选择滩羊与小尾寒羊杂交羔羊64 只，随机分为4 组，分别制备有机硒含量0.14（1组）、0.96（2组）、1.41（3组）、1.92 mg/d（4组）的饲粮。正式期60 d，每隔10 d随机选择参试羔羊2 只屠宰后，采集其代表性肌肉及内脏样品进行硒含量分析。结果表明：不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肌肉及其内脏组织硒沉积量有显著影响，各实验组分别饲喂其有机硒添加剂日粮10 d，羔羊背肌、股肌及其内脏组织硒沉积量即可达到DB 61/T 556—2012《富硒食品与其相关产品硒含量标准》的标准;实验2组、3组和4组分别饲喂其有机硒日粮20～30 d，羔羊背肌和股肌硒沉积量即可达到DBS 42/002—2014《富有机硒食品硒含量要求》的标准。
关键词：不同梯度;有机硒饲粮;羊肉及内脏;硒含量分析
Abstract： Sixty-four Tan × small-tailed Han crossbred lambs were divided using a randomized block design into 4 treatment groups designated as I， II， III and IV， which were supplemented with dietary organic selenium at 0.14， 0.96， 1.41 and 1.92 mg/d for 60 d， respectively. At 10 d intervals， two lambs from each group were randomly selected and slaughtered for measurement of selenium contents in representative samples of skeletal muscle and visceral tissues. The results showed that different levels of dietary organic selenium and feeding durations had a significant effect on selenium enrichment in lamb meat and visceral tissues. After 10 d of feeding， selenium contents in the dorsal and femoral muscle and visceral tissues of lambs reached the Shaanxi provincial standard for selenium contents in selenium-enriched foods and related products（DB 61/T 556—2012）. After 20 and 30 days， selenium contents in the dorsal and femoral muscles of lambs in Groups II–IV reached the Hubei provincial requirements for selenium contents in selenium-enriched foods （DBS 42/002—2014）.
Keywords： different gradients; dietary organic selenium; lamb meat and viscera; selenium content analysis
DOI：10.7506/rlyj1001-8123-20190320-063
中圖分类号：TS251.1 文献标志码：A 文章编号：1001-8123（2019）06-0007-06
引文格式：
李聚才， 施安， 张俊丽， 等. 不同梯度有机硒饲粮对羔羊肉及内脏组织硒沉积的影响[J]. 肉类研究， 2019， 33（6）： 7-12. DOI：10.7506/rlyj1001-8123-20190320-063. http：//www.rlyj.net.cn
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自从1817年瑞典化学家发现硒[1-3]之后，硒的作用和价值被充分挖掘，硒已成为人们非常关注的微量元素。硒是人体和动物所必需的微量元素[4-6]，具有防癌、抗癌、增强免疫力、防止糖尿病、白内障、心脑血管疾病、克山病、关节炎和大骨节病、解毒、排毒及保护肝脏等重要作用[7-8]。
硒元素缺乏影响人体和动物的健康水平。临床研究表明，人体硒缺乏会导致克山病、心脏疾病、胰腺炎、大骨节病和前列腺癌等40余种疾病[9-10]。我国城市居民的饮食结构中，成年人硒的日摄入量大约为0.02～0.03 mg，与中国营养学会提出的推荐值0.05～0.25 mg相差甚远[11]。研究发现，动物硒缺乏会导致脑软化症，并会降低成畜禽的繁殖能力，甚至导致不育。当幼畜体内缺乏硒元素时会发生白肌症，雏鸡体内缺乏硒元素时会发生渗出性素质病[12]。因而，富硒功能保健品的开发对提高国民健康水平和畜牧业高质量、可持续发展具有重要意义。 近年来，宁夏自然资源部门在开展多目标区域地球化学调查中，在引黄灌区首次发现富硒土地资源，成为我国又一个发现具有富硒土地资源的省份[4]。为加快富硒产业的发展，宁夏开展了富硒资源调查、富硒农产品基地建设、富硒农产品开发及富硒农产品品牌培育推介等[13]。
本研究通过开展不同梯度有机硒添加量的饲粮及日龄对羔羊胴体肌肉及其可食内脏组织硒沉积量的影响实验，探明有机硒的适宜添加剂量及时间节点，旨在为宁夏富硒羊肉产品的开发利用提供决策参考。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
有机硒为阿富硒2000（饲料级），总硒含量为2 000 mg/kg，其中有机硒含量为98%，达农威生物发酵工程技术（深圳）有限公司经销，美国达农威公司制造。
硒标准溶液GBW（E）080 215 中国计量科学研究院;硝酸、双氧水（均为优级纯）、硼氢化钾（分析纯） 天津市科密欧化学试剂有限公司;氢氧化钠（分析纯） 国药集团化学试剂有限公司。
1.2 仪器与设备
AFS-230E原子荧光光度计 上海仪器有限责任公司;U1traCLAVE4微波消化系统 莱伯泰科有限公司;Milli-Q超纯水器 美国Milli-Q公司;AL204电子天平 梅特勒-托利多（上海）仪器有限公司。
1.3 方法
1.3.1 实验动物选择与实验设计参试动物选自宁夏平罗县头闸镇某养殖专业合作社。实验采用随机区组设计，选择滩羊与小尾寒羊杂交组合60 日龄、断奶、体质量20 kg左右自繁自育的健康杂种羔羊64 只，随机分为4 组，设为实验1组、2组、3组和4组，互为对照。每组羔羊16 只，每只羔羊为1个重复。4 组参试羔羊平均初始体质量分别为（25.58±3.25）、（25.78±3.33）、（26.66±3.58）、（25.95±3.42） kg，组间体质量均值差异不显著（P>0.05）。研制4 个不同梯度有机硒含量的肉羊预混料配方，进而配制成精料补充料及其全混合日粮，分别对应饲喂实验1组、2组、3组和4组羔羊，各组隔栏分群养。
1.3.2 日粮营养水平及饲养管理
1.3.2.1 日糧营养水平基础日粮参照NY/T 816—2004《肉羊饲养标准》[14]，研制4 个不同梯度有机硒添加量的肉羊预混料配方为：VA 250 kIU/kg、VD 10 kIU/kg、VE 1 200 IU/kg、Co 0.2 mg/kg、Cu 10 mg/kg、I 1.0 mg/kg、Fe 25 mg/kg、Mn 20 mg/kg、Zn 35 mg/kg、阿富硒2000分别为6（1组）、40（2组）、60（3组）、80 mg/kg（4组）;分别配制成添加有机硒0.3（1组）、2.0（2组）、3.0（3组）、4.0 mg/kg（4组）的精料补充料，其原料和配方为：玉米57%、麸皮4.3%、细米糠4.2%、豆粕7.0%、葵花粕7.0%、棉粕5.7%、玉米胚芽饼4.2%、苹果渣4.2%、膨化料1.4%、预混料5%;压制成颗粒饲料（直径4 mm）。粗饲料为全株玉米青贮+玉米干秸秆+苜蓿干草+稷子干草+黄萝卜、青萝卜，各组饲粮的能量粗蛋白主营养水平一致。饲粮组成及营养水平如表1所示。
1.3.2.2 饲养管理
实验前对地面、隔栏、墙壁等进行清扫消毒，每组分圈单设饲槽和饮水器。实验期分为预饲期和正式期，预饲期10 d，期初进行体质量称测、免疫注射、驱虫健胃、建档编号与佩戴耳标等;正式期60 d，期间每隔10 d分别称测体质量。各圈舍饲养条件相同，自由饮水，日常管理方式一致。
1.3.3 样品采集与测定
1.3.3.1 样品采集
在正式期内每隔10 d，即分别于实验第10、20、30、40、50和60天分别随机选择参试羔羊2 只，禁食24 h后，在平罗县某牛羊肉生产加工车间集中定点屠宰，胴体静止30 min后分别采集具有代表性的背最长肌（简称背肌，下同）和股二头肌（简称股肌）及其肝脏和肺脏各250 g;其心脏和肾脏分别剔除包膜及脂肪组织后取单体样;分别入自封袋内包装封口、编号，置于冷藏箱内带回实验室，置于-20 ℃冰柜保存备用。实验期共选择屠宰参试羊48 只，采集其背肌、股肌及内脏样品共288 份供测试分析。
1.3.3.2 指标测定
参试羊肉及内脏样品按照GB 5009.93—2017《食品安全国家标准 食品中硒的测定》[15]，将采集、冷冻的样品解冻后分别粉碎、混匀，然后用原子荧光光谱法测定其硒含量。每个样品测试结果均为参试样品3 个平行样实测数据的均值。
1.3.3.3 评价参考标准
依据DB 61/T 556—2012《富硒食品与其相关产品硒含量标准》[16]，参考肉类及其制品中鲜肉硒含量标准0.02～0.50 mg/kg，肝和肾硒含量标准0.02～3.00 mg/kg;依据DBS 42/002—2014《富有机硒食品硒含量要求》[17]，参考其冷鲜肉总硒指标（以Se计，下同）0.20～1.00 mg/kg，内脏总硒指标0.20～2.00 mg/kg。
1.4 数据处理
应用Excel和IBM SPSS 20.0软件对数据进行整理和统计分析，选用单因素ANOVA-LSD法进行多重比较。结果均以“平均值±标准差”表示。
2 结果与分析
2.1 不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊背肌硒沉积量的影响由表2可知，随着饲粮中有机硒添加量的增加，羔羊背肌硒含量不同程度地增加，按其背肌硒含量由高到低排序均为4组>3组>2组>1组，与饲粮有机硒添加梯度相一致。且随着饲喂有机硒饲粮日龄的延长，羔羊背肌硒的含量总趋势也是逐渐增加。实验1组和3组饲喂50 d的沉积效果较好，实验2组和4组饲喂40 d的沉积效果较理想。结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊背肌硒沉积量有显著影响。实验4组饲喂其日粮10、20、30、40、50、60 d时背肌硒含量与1组相比分别同比高出130.76%、164.71%、370.59%、495.24%、450.00%和740.00%（P<0.01）。各参试组羔羊饲喂其日粮后，不同时间点背肌硒含量变化趋势不一，有待于深入研究。 2.2 不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊股肌硒沉积量的影响由表3可知：随着饲粮中有机硒添加量的增加，羔羊股肌硒含量也在不同程度增加，按其股肌硒含量由高到低排序，实验30 d时为4组>3组>2组>1组，与其饲粮有机硒添加梯度相一致;实验10、20、60 d时，3组的硒沉积效果较优，40 d时以4组较优;且随着饲喂有机硒饲粮日龄的增加，羔羊股肌硒含量也在不同程度地增加，实验1组和4组50 d时的股肌硒沉积效果较好，实验2组40 d时的股肌硒沉积效果较好，实验3组60 d时的股肌硒沉积效果较好。结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊股肌硒沉积量有显著影响。实验4组饲喂其日粮10、20、30、40、50、60 d时股肌硒含量与1组相比分别同比高出158.33%、104.76%、352.63%、267.86%、103.45%和469.23%（P<0.01）。
2.3 不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊心脏硒沉积量的影响由表4可知，随着饲粮中有机硒添加量的增加，羔羊心脏硒含量也在不同程度地增加，按其心脏硒含量由高到低排序，实验30、40、50、60 d时为4组>3组>2组>1组，与其饲粮有机硒添加梯度相一致，实验10、20 d时2组的硒沉积效果较优。随着饲喂有机硒饲粮日龄的增加，羔羊心脏硒含量不一，实验1组、2组和4组饲喂其日粮20 d时的硒沉积效果较好，实验3组饲喂其日粮50 d时的硒沉积效果较好。结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊心脏硒沉积量有显著影响。实验4组饲喂其日粮10、20、30、40、50、60 d时心脏硒含量与1组相比分别同比高出31.72%、63.96%、148.98%、264.10%、244.74%和260.61%（P<0.01）。
2.4 不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肺脏硒沉积量的影响由表5可知，随着饲粮中有机硒添加量的增加，羔羊肺脏硒沉积量也不同程度增加，按其肺脏硒含量由高到低排序，实验10、30、40、50、60 d时为4组>3组>2组>1组，与其饲粮有机硒添加梯度相一致。随着饲喂有機硒饲粮日龄的增加，羔羊肺脏硒含量也不同程度增加。实验1组以饲喂其日粮30 d时的肺脏硒沉积效果较好，实验2组、3组和4组以饲喂其日粮20 d时的肺脏硒沉积效果较好。结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肺脏硒沉积量有显著影响。实验4组饲喂其日粮10、20、30、40、50、60 d时肺脏硒含量与1组相比分别同比高出117.65%、442.11%、105.88%、176.19%、138.78%和213.33%（P<0.01）。
2.5 不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肝脏硒沉积量的影响由表6可知，随着饲粮中有机硒添加量的增加，羔羊肝脏硒含量也在不同程度地增加，按其肝脏硒含量由高到低排序，实验60 d时为4组>3组>2组>1组，与其饲粮有机硒添加梯度相一致。实验10 d时以4组的硒沉积效果较优，实验20、30 d时3组较优，实验40、50 d时2组较优。随着饲喂有机硒饲粮日龄的增加，羔羊肝脏硒含量也不同程度增加。按其肝脏硒含量由高到低排序，实验1组和2组饲喂其日粮50 d时的肝脏硒沉积效果较好，实验4组饲喂其日粮60 d时的肝脏硒沉积效果较好，实验3组饲喂其日粮30 d时的肝脏硒沉积效果较好。结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肝脏硒沉积量有显著影响。实验4组饲喂其日粮10、20、30、40、50、60 d时肝脏硒含量与1组相比分别同比高出285.19%、116.67%、132.47%、300.00%、87.36%和267.44%（P<0.01）。
2.6 不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肾脏硒沉积量的影响由表7可知，随着饲粮中有机硒添加量的增加，羔羊肾脏硒含量也不同程度增加，按其肾脏硒含量由高到低排序，实验10 d和40 d时为4组>3组>2组>1组，与其饲粮有机硒添加梯度相一致。实验20 d时以4组的硒沉积效果较优，实验50 d时2组较优，实验60 d时3组较优。随着饲喂有机硒饲粮日龄的增加，羔羊肾脏硒含量也不同程度增加。按其肾脏硒含量由高到低排序，实验1组饲喂其日粮30 d时肾脏硒沉积效果较好。结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肾脏硒沉积量有一定影响。实验4组饲喂其日粮10、20、40、50 d时肾脏硒含量与1组相比分别同比高出50.63%、121.95%、191.75%（P<0.01）和10.38%。实验30 d时，实验1组的硒沉积效果较优，且比实验4组高24.24%，实验60 d时实验3组较优，且实验1组比4组高1.00%，有待于进一步研究。
综合本研究结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肌肉及其内脏组织硒沉积量有显著影响。各实验组分别饲喂其有机硒添加剂日粮10 d，羔羊背肌、股肌及其内脏组织硒沉积量即可达到DB 61/T 556—2012《富硒食品与其相关产品硒含量标准》中的标准;实验2组、3组和4组分别饲喂其富有机硒日粮20 d时羔羊背肌硒沉积量、实验3组和4组饲喂其日粮20 d、实验2组饲喂40 d、实验1组饲喂50 d时羔羊股肌硒沉积量、实验1组、2组、3组和4组分别饲喂其日粮10 d时羔羊肝脏和肾脏硒沉积量、饲喂其日粮20～30 d时羔羊心脏和肺脏硒沉积量即可达到DBS 42/002—2014《富有机硒食品硒含量要求》准。
3 讨 论
有机硒是生物体微营养硒元素理想的补充方式。硒是一种带负电荷的非金属元素，在自然界中按其结合方式可分为无机硒和有机硒2 种形态，以无机形式存在的硒有硒酸钠、亚硒酸钠和硒化氢，以有机形式存在的硒主要有以谷胱甘肽过氧化物酶存在的硒蛋白质和以硒代蛋氨酸和硒代胱氨酸存在的硒代氨基酸[18-19]。根据硒的结合方式，一般选用有机硒和无机硒2 种方式对生物体进行硒元素的补充。有机硒生物活性较高，容易被肠道吸收且无污染，便于使用，目前有机硒应用最广泛。硒元素与人体内的蛋白质结合生成有营养价值的硒代多糖、硒代氨基酸和硒代蛋白质等有机硒。 人和動物通过食物摄入硒源，经肠道吸收后与血浆蛋白质结合，经血液循环运输到各组织中，主要以硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸的形式结合到组织蛋白中去。硒在体内通过酶的一系列还原反应形成硒化氢，再经甲基转移酶甲基化后形成二甲基衍生物，经肾脏排泄。硒吸收量过多时也可经肺排泄。当硒含量过高时，它能与含硫化合物中的硫竞争并最后取代化合物中的硫，进而抑制细胞代谢的氧化过程，对机体产生毒害作用。但是适量的硒存在于机体内时，其便能发挥出多方面的生理、生化功能。对反刍动物而言，硒是瘤胃微生物的必需微量元素，补充适量硒可以促进瘤胃微生物的生长繁殖，增加瘤胃微生物数量，减少瘤胃微生物的氧化损伤，提高瘤胃微生物的生物活性，从而促进瘤胃发酵功能、提高饲料的消化率。本研究结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肌肉及内脏组织硒沉积具有影响，与伏映萍[20]、刘彩凤[21]等研究得出的在饲粮中添加适量硒不仅能够增加滩羊日增体质量、提高育肥效果及其肌肉嫩度等以及张磊等[22]对紫阳县陕南白山羊肌肉组织、血液和毛发硒含量的分析结果相吻合;且与施安[23]、
李聚才[24]等得出的在日粮中添加硒制剂能明显改善滩湖F2代羔羊的育肥性能和肉品质等研究结果相一致。澳大利亚农业委员会（Standing Committee on Agriculture，SCA）关于绵羊饲粮干物质中微量元素硒的推荐量为0.05 g/kg[25]。美国国家研究委员会（National Research Council of the United States，NRC）成员研讨反刍动物饲喂硒的实验结果，将推荐的最大耐受量上限由NRC 1980年确定的2 mg/kg饲粮干物质调整为5 mg/kg饲粮干物质[26]，超过这个剂量为毒性剂量。因此，对动物补硒应根据补硒形式掌握合理添加剂量。
中国营养学会已将人体必需的微量元素硒列为15 种每日膳食营养素之一。中国营养学会推荐我国成年居民膳食营养素硒参考摄入量为0.06～0.40 mg/d[27]。每日摄入0.20 mg的硒可以有效防止癌症的发生，日摄入大于0.30 mg便可以对癌症起到一定的治疗效果。在美国，近年来已经将硒运用于多种癌症的治疗上，通过让患者每日摄入2.0 mg硒治疗癌症，并取得了非常好的效果[8]。然而，硒也是一种超剂量使用会对人体和动物产生毒害副作用的营养素，安全范围相对较窄，在强化过程中必须注意硒的添加剂量，强化使用时必须以相关国标或行标为参考[28]。
4 结 论
不同梯度有机硒添加饲喂量及日龄对羔羊肌肉及其内脏组织硒沉积量有显著影响。饲粮中添加有机硒0.14、0.96、1.41、1.92 mg/d、饲喂10 d，育肥羔羊肉及内脏组织硒沉积量即可达到DB 61/T 556—2012标准;选择添加有机硒1.41 mg/kg的饲粮饲喂20～30 d，育肥羔羊肉及内脏组织硒沉积量即可达到DBS 42/002—2014标准。
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关键词：不同梯度;有机硒饲粮;羊肉及内脏;硒含量分析
Abstract： Sixty-four Tan × small-tailed Han crossbred lambs were divided using a randomized block design into 4 treatment groups designated as I， II， III and IV， which were supplemented with dietary organic selenium at 0.14， 0.96， 1.41 and 1.92 mg/d for 60 d， respectively. At 10 d intervals， two lambs from each group were randomly selected and slaughtered for measurement of selenium contents in representative samples of skeletal muscle and visceral tissues. The results showed that different levels of dietary organic selenium and feeding durations had a significant effect on selenium enrichment in lamb meat and visceral tissues. After 10 d of feeding， selenium contents in the dorsal and femoral muscle and visceral tissues of lambs reached the Shaanxi provincial standard for selenium contents in selenium-enriched foods and related products（DB 61/T 556—2012）. After 20 and 30 days， selenium contents in the dorsal and femoral muscles of lambs in Groups II–IV reached the Hubei provincial requirements for selenium contents in selenium-enriched foods （DBS 42/002—2014）.
Keywords： different gradients; dietary organic selenium; lamb meat and viscera; selenium content analysis
DOI：10.7506/rlyj1001-8123-20190320-063
中圖分类号：TS251.1 文献标志码：A 文章编号：1001-8123（2019）06-0007-06
引文格式：
李聚才， 施安， 张俊丽， 等. 不同梯度有机硒饲粮对羔羊肉及内脏组织硒沉积的影响[J]. 肉类研究， 2019， 33（6）： 7-12. DOI：10.7506/rlyj1001-8123-20190320-063. http：//www.rlyj.net.cn
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自从1817年瑞典化学家发现硒[1-3]之后，硒的作用和价值被充分挖掘，硒已成为人们非常关注的微量元素。硒是人体和动物所必需的微量元素[4-6]，具有防癌、抗癌、增强免疫力、防止糖尿病、白内障、心脑血管疾病、克山病、关节炎和大骨节病、解毒、排毒及保护肝脏等重要作用[7-8]。
硒元素缺乏影响人体和动物的健康水平。临床研究表明，人体硒缺乏会导致克山病、心脏疾病、胰腺炎、大骨节病和前列腺癌等40余种疾病[9-10]。我国城市居民的饮食结构中，成年人硒的日摄入量大约为0.02～0.03 mg，与中国营养学会提出的推荐值0.05～0.25 mg相差甚远[11]。研究发现，动物硒缺乏会导致脑软化症，并会降低成畜禽的繁殖能力，甚至导致不育。当幼畜体内缺乏硒元素时会发生白肌症，雏鸡体内缺乏硒元素时会发生渗出性素质病[12]。因而，富硒功能保健品的开发对提高国民健康水平和畜牧业高质量、可持续发展具有重要意义。 近年来，宁夏自然资源部门在开展多目标区域地球化学调查中，在引黄灌区首次发现富硒土地资源，成为我国又一个发现具有富硒土地资源的省份[4]。为加快富硒产业的发展，宁夏开展了富硒资源调查、富硒农产品基地建设、富硒农产品开发及富硒农产品品牌培育推介等[13]。
本研究通过开展不同梯度有机硒添加量的饲粮及日龄对羔羊胴体肌肉及其可食内脏组织硒沉积量的影响实验，探明有机硒的适宜添加剂量及时间节点，旨在为宁夏富硒羊肉产品的开发利用提供决策参考。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
有机硒为阿富硒2000（饲料级），总硒含量为2 000 mg/kg，其中有机硒含量为98%，达农威生物发酵工程技术（深圳）有限公司经销，美国达农威公司制造。
硒标准溶液GBW（E）080 215 中国计量科学研究院;硝酸、双氧水（均为优级纯）、硼氢化钾（分析纯） 天津市科密欧化学试剂有限公司;氢氧化钠（分析纯） 国药集团化学试剂有限公司。
1.2 仪器与设备
AFS-230E原子荧光光度计 上海仪器有限责任公司;U1traCLAVE4微波消化系统 莱伯泰科有限公司;Milli-Q超纯水器 美国Milli-Q公司;AL204电子天平 梅特勒-托利多（上海）仪器有限公司。
1.3 方法
1.3.1 实验动物选择与实验设计参试动物选自宁夏平罗县头闸镇某养殖专业合作社。实验采用随机区组设计，选择滩羊与小尾寒羊杂交组合60 日龄、断奶、体质量20 kg左右自繁自育的健康杂种羔羊64 只，随机分为4 组，设为实验1组、2组、3组和4组，互为对照。每组羔羊16 只，每只羔羊为1个重复。4 组参试羔羊平均初始体质量分别为（25.58±3.25）、（25.78±3.33）、（26.66±3.58）、（25.95±3.42） kg，组间体质量均值差异不显著（P>0.05）。研制4 个不同梯度有机硒含量的肉羊预混料配方，进而配制成精料补充料及其全混合日粮，分别对应饲喂实验1组、2组、3组和4组羔羊，各组隔栏分群养。
1.3.2 日粮营养水平及饲养管理
1.3.2.1 日糧营养水平基础日粮参照NY/T 816—2004《肉羊饲养标准》[14]，研制4 个不同梯度有机硒添加量的肉羊预混料配方为：VA 250 kIU/kg、VD 10 kIU/kg、VE 1 200 IU/kg、Co 0.2 mg/kg、Cu 10 mg/kg、I 1.0 mg/kg、Fe 25 mg/kg、Mn 20 mg/kg、Zn 35 mg/kg、阿富硒2000分别为6（1组）、40（2组）、60（3组）、80 mg/kg（4组）;分别配制成添加有机硒0.3（1组）、2.0（2组）、3.0（3组）、4.0 mg/kg（4组）的精料补充料，其原料和配方为：玉米57%、麸皮4.3%、细米糠4.2%、豆粕7.0%、葵花粕7.0%、棉粕5.7%、玉米胚芽饼4.2%、苹果渣4.2%、膨化料1.4%、预混料5%;压制成颗粒饲料（直径4 mm）。粗饲料为全株玉米青贮+玉米干秸秆+苜蓿干草+稷子干草+黄萝卜、青萝卜，各组饲粮的能量粗蛋白主营养水平一致。饲粮组成及营养水平如表1所示。
1.3.2.2 饲养管理
实验前对地面、隔栏、墙壁等进行清扫消毒，每组分圈单设饲槽和饮水器。实验期分为预饲期和正式期，预饲期10 d，期初进行体质量称测、免疫注射、驱虫健胃、建档编号与佩戴耳标等;正式期60 d，期间每隔10 d分别称测体质量。各圈舍饲养条件相同，自由饮水，日常管理方式一致。
1.3.3 样品采集与测定
1.3.3.1 样品采集
在正式期内每隔10 d，即分别于实验第10、20、30、40、50和60天分别随机选择参试羔羊2 只，禁食24 h后，在平罗县某牛羊肉生产加工车间集中定点屠宰，胴体静止30 min后分别采集具有代表性的背最长肌（简称背肌，下同）和股二头肌（简称股肌）及其肝脏和肺脏各250 g;其心脏和肾脏分别剔除包膜及脂肪组织后取单体样;分别入自封袋内包装封口、编号，置于冷藏箱内带回实验室，置于-20 ℃冰柜保存备用。实验期共选择屠宰参试羊48 只，采集其背肌、股肌及内脏样品共288 份供测试分析。
1.3.3.2 指标测定
参试羊肉及内脏样品按照GB 5009.93—2017《食品安全国家标准 食品中硒的测定》[15]，将采集、冷冻的样品解冻后分别粉碎、混匀，然后用原子荧光光谱法测定其硒含量。每个样品测试结果均为参试样品3 个平行样实测数据的均值。
1.3.3.3 评价参考标准
依据DB 61/T 556—2012《富硒食品与其相关产品硒含量标准》[16]，参考肉类及其制品中鲜肉硒含量标准0.02～0.50 mg/kg，肝和肾硒含量标准0.02～3.00 mg/kg;依据DBS 42/002—2014《富有机硒食品硒含量要求》[17]，参考其冷鲜肉总硒指标（以Se计，下同）0.20～1.00 mg/kg，内脏总硒指标0.20～2.00 mg/kg。
1.4 数据处理
应用Excel和IBM SPSS 20.0软件对数据进行整理和统计分析，选用单因素ANOVA-LSD法进行多重比较。结果均以“平均值±标准差”表示。
2 结果与分析
2.1 不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊背肌硒沉积量的影响由表2可知，随着饲粮中有机硒添加量的增加，羔羊背肌硒含量不同程度地增加，按其背肌硒含量由高到低排序均为4组>3组>2组>1组，与饲粮有机硒添加梯度相一致。且随着饲喂有机硒饲粮日龄的延长，羔羊背肌硒的含量总趋势也是逐渐增加。实验1组和3组饲喂50 d的沉积效果较好，实验2组和4组饲喂40 d的沉积效果较理想。结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊背肌硒沉积量有显著影响。实验4组饲喂其日粮10、20、30、40、50、60 d时背肌硒含量与1组相比分别同比高出130.76%、164.71%、370.59%、495.24%、450.00%和740.00%（P<0.01）。各参试组羔羊饲喂其日粮后，不同时间点背肌硒含量变化趋势不一，有待于深入研究。 2.2 不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊股肌硒沉积量的影响由表3可知：随着饲粮中有机硒添加量的增加，羔羊股肌硒含量也在不同程度增加，按其股肌硒含量由高到低排序，实验30 d时为4组>3组>2组>1组，与其饲粮有机硒添加梯度相一致;实验10、20、60 d时，3组的硒沉积效果较优，40 d时以4组较优;且随着饲喂有机硒饲粮日龄的增加，羔羊股肌硒含量也在不同程度地增加，实验1组和4组50 d时的股肌硒沉积效果较好，实验2组40 d时的股肌硒沉积效果较好，实验3组60 d时的股肌硒沉积效果较好。结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊股肌硒沉积量有显著影响。实验4组饲喂其日粮10、20、30、40、50、60 d时股肌硒含量与1组相比分别同比高出158.33%、104.76%、352.63%、267.86%、103.45%和469.23%（P<0.01）。
2.3 不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊心脏硒沉积量的影响由表4可知，随着饲粮中有机硒添加量的增加，羔羊心脏硒含量也在不同程度地增加，按其心脏硒含量由高到低排序，实验30、40、50、60 d时为4组>3组>2组>1组，与其饲粮有机硒添加梯度相一致，实验10、20 d时2组的硒沉积效果较优。随着饲喂有机硒饲粮日龄的增加，羔羊心脏硒含量不一，实验1组、2组和4组饲喂其日粮20 d时的硒沉积效果较好，实验3组饲喂其日粮50 d时的硒沉积效果较好。结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊心脏硒沉积量有显著影响。实验4组饲喂其日粮10、20、30、40、50、60 d时心脏硒含量与1组相比分别同比高出31.72%、63.96%、148.98%、264.10%、244.74%和260.61%（P<0.01）。
2.4 不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肺脏硒沉积量的影响由表5可知，随着饲粮中有机硒添加量的增加，羔羊肺脏硒沉积量也不同程度增加，按其肺脏硒含量由高到低排序，实验10、30、40、50、60 d时为4组>3组>2组>1组，与其饲粮有机硒添加梯度相一致。随着饲喂有機硒饲粮日龄的增加，羔羊肺脏硒含量也不同程度增加。实验1组以饲喂其日粮30 d时的肺脏硒沉积效果较好，实验2组、3组和4组以饲喂其日粮20 d时的肺脏硒沉积效果较好。结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肺脏硒沉积量有显著影响。实验4组饲喂其日粮10、20、30、40、50、60 d时肺脏硒含量与1组相比分别同比高出117.65%、442.11%、105.88%、176.19%、138.78%和213.33%（P<0.01）。
2.5 不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肝脏硒沉积量的影响由表6可知，随着饲粮中有机硒添加量的增加，羔羊肝脏硒含量也在不同程度地增加，按其肝脏硒含量由高到低排序，实验60 d时为4组>3组>2组>1组，与其饲粮有机硒添加梯度相一致。实验10 d时以4组的硒沉积效果较优，实验20、30 d时3组较优，实验40、50 d时2组较优。随着饲喂有机硒饲粮日龄的增加，羔羊肝脏硒含量也不同程度增加。按其肝脏硒含量由高到低排序，实验1组和2组饲喂其日粮50 d时的肝脏硒沉积效果较好，实验4组饲喂其日粮60 d时的肝脏硒沉积效果较好，实验3组饲喂其日粮30 d时的肝脏硒沉积效果较好。结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肝脏硒沉积量有显著影响。实验4组饲喂其日粮10、20、30、40、50、60 d时肝脏硒含量与1组相比分别同比高出285.19%、116.67%、132.47%、300.00%、87.36%和267.44%（P<0.01）。
2.6 不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肾脏硒沉积量的影响由表7可知，随着饲粮中有机硒添加量的增加，羔羊肾脏硒含量也不同程度增加，按其肾脏硒含量由高到低排序，实验10 d和40 d时为4组>3组>2组>1组，与其饲粮有机硒添加梯度相一致。实验20 d时以4组的硒沉积效果较优，实验50 d时2组较优，实验60 d时3组较优。随着饲喂有机硒饲粮日龄的增加，羔羊肾脏硒含量也不同程度增加。按其肾脏硒含量由高到低排序，实验1组饲喂其日粮30 d时肾脏硒沉积效果较好。结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肾脏硒沉积量有一定影响。实验4组饲喂其日粮10、20、40、50 d时肾脏硒含量与1组相比分别同比高出50.63%、121.95%、191.75%（P<0.01）和10.38%。实验30 d时，实验1组的硒沉积效果较优，且比实验4组高24.24%，实验60 d时实验3组较优，且实验1组比4组高1.00%，有待于进一步研究。
综合本研究结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肌肉及其内脏组织硒沉积量有显著影响。各实验组分别饲喂其有机硒添加剂日粮10 d，羔羊背肌、股肌及其内脏组织硒沉积量即可达到DB 61/T 556—2012《富硒食品与其相关产品硒含量标准》中的标准;实验2组、3组和4组分别饲喂其富有机硒日粮20 d时羔羊背肌硒沉积量、实验3组和4组饲喂其日粮20 d、实验2组饲喂40 d、实验1组饲喂50 d时羔羊股肌硒沉积量、实验1组、2组、3组和4组分别饲喂其日粮10 d时羔羊肝脏和肾脏硒沉积量、饲喂其日粮20～30 d时羔羊心脏和肺脏硒沉积量即可达到DBS 42/002—2014《富有机硒食品硒含量要求》准。
3 讨 论
有机硒是生物体微营养硒元素理想的补充方式。硒是一种带负电荷的非金属元素，在自然界中按其结合方式可分为无机硒和有机硒2 种形态，以无机形式存在的硒有硒酸钠、亚硒酸钠和硒化氢，以有机形式存在的硒主要有以谷胱甘肽过氧化物酶存在的硒蛋白质和以硒代蛋氨酸和硒代胱氨酸存在的硒代氨基酸[18-19]。根据硒的结合方式，一般选用有机硒和无机硒2 种方式对生物体进行硒元素的补充。有机硒生物活性较高，容易被肠道吸收且无污染，便于使用，目前有机硒应用最广泛。硒元素与人体内的蛋白质结合生成有营养价值的硒代多糖、硒代氨基酸和硒代蛋白质等有机硒。 人和動物通过食物摄入硒源，经肠道吸收后与血浆蛋白质结合，经血液循环运输到各组织中，主要以硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸的形式结合到组织蛋白中去。硒在体内通过酶的一系列还原反应形成硒化氢，再经甲基转移酶甲基化后形成二甲基衍生物，经肾脏排泄。硒吸收量过多时也可经肺排泄。当硒含量过高时，它能与含硫化合物中的硫竞争并最后取代化合物中的硫，进而抑制细胞代谢的氧化过程，对机体产生毒害作用。但是适量的硒存在于机体内时，其便能发挥出多方面的生理、生化功能。对反刍动物而言，硒是瘤胃微生物的必需微量元素，补充适量硒可以促进瘤胃微生物的生长繁殖，增加瘤胃微生物数量，减少瘤胃微生物的氧化损伤，提高瘤胃微生物的生物活性，从而促进瘤胃发酵功能、提高饲料的消化率。本研究结果表明，不同梯度有机硒添加量及日龄对羔羊肌肉及内脏组织硒沉积具有影响，与伏映萍[20]、刘彩凤[21]等研究得出的在饲粮中添加适量硒不仅能够增加滩羊日增体质量、提高育肥效果及其肌肉嫩度等以及张磊等[22]对紫阳县陕南白山羊肌肉组织、血液和毛发硒含量的分析结果相吻合;且与施安[23]、
李聚才[24]等得出的在日粮中添加硒制剂能明显改善滩湖F2代羔羊的育肥性能和肉品质等研究结果相一致。澳大利亚农业委员会（Standing Committee on Agriculture，SCA）关于绵羊饲粮干物质中微量元素硒的推荐量为0.05 g/kg[25]。美国国家研究委员会（National Research Council of the United States，NRC）成员研讨反刍动物饲喂硒的实验结果，将推荐的最大耐受量上限由NRC 1980年确定的2 mg/kg饲粮干物质调整为5 mg/kg饲粮干物质[26]，超过这个剂量为毒性剂量。因此，对动物补硒应根据补硒形式掌握合理添加剂量。
中国营养学会已将人体必需的微量元素硒列为15 种每日膳食营养素之一。中国营养学会推荐我国成年居民膳食营养素硒参考摄入量为0.06～0.40 mg/d[27]。每日摄入0.20 mg的硒可以有效防止癌症的发生，日摄入大于0.30 mg便可以对癌症起到一定的治疗效果。在美国，近年来已经将硒运用于多种癌症的治疗上，通过让患者每日摄入2.0 mg硒治疗癌症，并取得了非常好的效果[8]。然而，硒也是一种超剂量使用会对人体和动物产生毒害副作用的营养素，安全范围相对较窄，在强化过程中必须注意硒的添加剂量，强化使用时必须以相关国标或行标为参考[28]。
4 结 论
不同梯度有机硒添加饲喂量及日龄对羔羊肌肉及其内脏组织硒沉积量有显著影响。饲粮中添加有机硒0.14、0.96、1.41、1.92 mg/d、饲喂10 d，育肥羔羊肉及内脏组织硒沉积量即可达到DB 61/T 556—2012标准;选择添加有机硒1.41 mg/kg的饲粮饲喂20～30 d，育肥羔羊肉及内脏组织硒沉积量即可达到DBS 42/002—2014标准。
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