【摘 要】
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为了建立体外模拟氧自由基诱导的细胞氧化损伤模型,本试验采用Percoll密度梯度离心法纯化原代大鼠Leydig细胞,并鉴定特异性蛋白3t3-HSD;采用MTT法测定细胞活力,流式细胞术检测细
【机 构】
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南京农业大学动物医学院/农业部动物生理生化重点开放实验室
【基金项目】
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江苏省自然科学基金项目(BK2011647);中央高校科研基本业务费(KYZ201151)
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为了建立体外模拟氧自由基诱导的细胞氧化损伤模型,本试验采用Percoll密度梯度离心法纯化原代大鼠Leydig细胞,并鉴定特异性蛋白3t3-HSD;采用MTT法测定细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率、线粒体膜电位、ROS以及O;含量,比色法测定·OH、MDA的含量以及抗氧化物酶SOD、CAT和POD的活性。结果显示:特异性蛋白3B—HSD鉴定后,荧光显微镜观察到大部分细胞呈现特异性荧光。MTT测定结果显示,300~1000μmol·L~H2O2处理细胞均可极显著降低细胞活力(P〈0.0
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