【摘 要】
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目的 建立外周血(peripheral blood, PB)和脐血(cord blood ,CB)来源的CD+34细胞体外定向诱导扩增巨核细胞(megakaryocyte, MK)的最佳体系,探讨两种来源巨核细胞的扩增差异.
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目的 建立外周血(peripheral blood, PB)和脐血(cord blood ,CB)来源的CD+34细胞体外定向诱导扩增巨核细胞(megakaryocyte, MK)的最佳体系,探讨两种来源巨核细胞的扩增差异.方法 以Ficoll-Hapaque分离"动员"的外周血和脐血单个核细胞,免疫磁珠分离纯化CD+34细胞,在含胎牛血清的液体培养体系中,以不同细胞因子组合诱导两种来源的CD+34细胞,定时进行细胞计数和流式细胞术检测培养体系中CD+41细胞的含量;同时采用甲基纤维素半固体培养法进行巨核细胞集落培养,测定巨核细胞集落形成单位的数量.结果 在血小板生成素(thrombopoietin, TPO)+ 胎肝酪氨酸激酶配体(FLT-3 ligand, FL)+ 白介素6 (interleukin-6, IL-6)+IL-3组合中,外周血来源的CD+41细胞第10天扩增了131±18倍,脐血来源的CD+41细胞在培养的第14天扩增了193±25倍,为增殖高峰.均明显高于同来源的其他3组(P＜0.05),随着时间的推移两者的CD+41细胞扩增倍数均呈下降趋势.结论 TPO+FL+IL-6+IL-3组合均为CB和PB体外诱导扩增巨核细胞的最佳组合.CB来源的巨核细胞较PB来源的巨核细胞有更强的增生能力,而PB来源的CD+34细胞产生巨核细胞的时间较CB来源的短,与临床上外周血造血干细胞移植的血小板造血重建快于脐血移植相一致.
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