【摘 要】
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目的克隆乳腺珠蛋白(human mammaglobin,hMAM)编码全长cDNA,原核表达并纯化蛋白产物,为后期研制乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础,从而为早期发现乳腺癌提供科学的监测方法.方法
【机 构】
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第三军医大学,第三军医大学,NationalCenterforHIV
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目的克隆乳腺珠蛋白(human mammaglobin,hMAM)编码全长cDNA,原核表达并纯化蛋白产物,为后期研制乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础,从而为早期发现乳腺癌提供科学的监测方法.方法自乳腺癌组织提取总RNA,通过RT-PCR克隆hMAMcDNA,构建pQE40-hMAM表达质粒,在大肠杆菌M15中表达,利用镍-亚硝胺乙酸组氨酸(Ni-NTA-His)亲和层析法对重组蛋白进行纯化.结果表达的融合蛋白以不溶性包涵体形式存在,纯化后得到纯度为97%的目的蛋白.结论成功地纯化出hMAM重组蛋白.
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