大理州烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性测定

来源 :中国烟草科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cardio
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  摘 要:采用含药平板法建立烟草黑胫病菌对杀菌剂烯酰吗啉的敏感基线,并测定了2013年从云南省大理州各烟区分离纯化的烟草黑胫病菌菌株对烯酰吗啉的敏感性。结果显示,烟草黑胫病菌的敏感基线为1.4656 μg/mL;68个田间菌株对烯酰吗啉的EC50值在0.5857~2.5254 μg/mL之间,平均为1.1118 μg/mL。表明烯酰吗啉对烟草黑胫病菌的活性较高,大理州烟草黑胫病菌的抗药性风险较低。烯酰吗啉可用于大理州烟草黑胫病的有效防控,但应与其他杀菌剂进行合理的轮换使用。
  关键词:烟草疫霉;黑胫病;烯酰吗啉;敏感性
  中图分类号:S572.09 文章编号:1007-5119(2015)01-0102-05 DOI:10.13496/j.issn.1007-5119.2015.01.019
  Sensitivity Detection of Tobacco Black Shank Pathogens to Fungicide Dimethomorph in Dali, Yunnan
  HU Yanxia1, PEI Weihua2, CAO Jifen2, ZHOU Lifeng2, WANG Xinzhong1,
  XU Fahua1, YANG Mingying2, ZHAO Zhijian2*
  (1. Dali Branch of Yunnan Tobacco Company, Dali, Yunnan 671000, China; 2. Agricultural Environment & Resources Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Kunming 650205, China)
  Abstract: It is crucial and helpful for plant disease management to detect resistance level of fungicide. Baseline sensitivity of Phytophthora nicotianae to fungicide dimethomorph was established based on in vitro assay and the dimethomorph resistance level of black shank pathogens collected from different tobacco planting zones in Dali were measured. The results showed that baseline sensitivity of P. nicotianae to dimethomorph was 1.4656 μg/mL. The range of EC50 values of all sixty-eight field isolates to dimethomorph was 0.5857 to 2.5254 μg/mL, in which average value was 1.1118 μg/mL. This result suggest that P. nicotianae isolates collected from Dali were high sensitive to dimethomorph and the resistance risk of black shank pathogens was low. Dimethomorph can be deployed to prevent tobacco black shank effectively, but it should be a reasonable rotation with different fungicides.
  Keywords: Phytophthora nicotianae; black shank disease; dimethomorph; sensitivity to fungicide
  烟草黑胫病(Black shank disease)又称烟草疫病,是世界烟草生产的毁灭性病害之一,其病原菌为烟草疫霉(Phytophthora nicotianae),目前该病原菌已在我国各烟区广泛分布[1]。由于云南独特的地理、生态环境,适宜烟草黑胫病菌的生长繁殖,全省主要烟区黑胫病常年发生,为害严重。尤其是大理州,主栽品种为品质较好的易感病品种“红花大金元”[2],黑胫病平均发病率为20%~40%,严重田块发病率高达70%~80%,甚至造成绝产,每年给烟农造成严重的经济损失。虽然利用抗病品种是控制黑胫病最经济有效的手段之一,但由于烟草高品质抗性品种匮乏,目前生产上对烟草黑胫病的防治主要依赖于化学防治。
  长期以来,我国对疫霉菌引起的作物疫病防治主要依赖于有效成分含有甲霜灵的杀菌剂,由于其作用位点单一,病原菌容易发生突变产生抗药性,从而导致防治效果明显下降[3-5]。近年来对一些烤烟产区黑胫病菌的监测结果表明,我国的烟草黑胫病菌已经对甲霜灵存在不同程度的抗药性[6-7]。因此,为了有效地对黑胫病进行防治,急需筛选出一批安
  基金项目:中国烟草总公司云南省公司科技计划项目(2013YN27)
  作者简介:户艳霞,硕士,农艺师,主要从事烟草植保、栽培等工作。E-mail:[email protected]。*通信作者,E-mail:[email protected]
  收稿日期:2014-07-18 修回日期:2015-01-09
  全、高效的杀菌剂进行合理的替代或轮换。
  烯酰吗啉是羧酸氨基类杀菌剂,主要用于防治卵菌纲病原菌引起的葡萄霜霉病、白菜霜霉病、番茄晚疫病、马铃薯晚疫病、辣椒疫病、荔枝霜疫霉病、大豆疫霉根腐病等,是一种新型的高效内吸性杀菌剂,对疫霉属具有独特的作用方式[8-9],是继甲霜灵之后防治卵菌病害的又一理想杀菌剂,国外普遍应用于防治烟草黑胫病。近年来,我国烟区已开始使用烯酰吗啉类杀菌剂对该病害进行防治[7]。因此研究烟草黑胫病菌田间菌株对烯酰吗啉的敏感性及其抗药性风险,对预测病原菌抗药群体的发展动态和制定抗性治理策略具有重要的意义。本研究首次分析了云南大理州烟草黑胫病菌对新型杀菌剂烯酰吗啉的敏感性,旨在建立烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性基线,并对大理州烟草黑胫病菌的抗药性水平进行监测,以期为田间抗药性风险的评估和抗性治理提供理论依据,指导烟草安全生产。   1 材料与方法
  1.1 仪器设备
  用于烟草黑胫病菌分离培养的培养箱为上海一恒生化培养箱(LRH-250F),培养条件为25 ℃黑暗培养。超净工作台为上海智诚ZHJH-C1112B型超净工作台。
  1.2 供试菌株
  供试烟草黑胫病菌菌株68个。2013年从云南省大理州种植烤烟品种“红花大金元”的10个县市的不同烟区采集具有黑胫病典型症状的病株,于加有抗生素的选择性黑麦培养基(RSA)上分离纯化所得。所有烟草黑胫病菌菌株黑暗保存于10 ℃菌种保存柜。
  1.3 供试药剂
  供试的95%烯酰吗啉原药用分析纯丙酮溶解,配制成10 μg/mL贮液,保存于4 ℃冰箱中备用。
  1.4 烯酰吗啉敏感基线的建立
  根据地域的差异,从不同烟区选出11个菌株用含药平板法进行烯酰吗啉敏感性测定。供试菌株在黑麦培养基上25 ℃黑暗培养5~7 d后,分别配制含烯酰吗啉0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0 ?g/mL的8个不同浓度梯度的V8培养基平板。用直径为5 mm的打孔器在相同圆周的菌落边缘上切取菌饼,将菌饼正面朝下,分别接种到含烯酰吗啉系列浓度梯度的V8培养基平板上,每处理3次重复,置于25 ℃恒温培养箱中黑暗培养3 d后,用十字交叉法测量菌落生长直径。根据菌落直径计算出生长量,计算烯酰吗啉各浓度梯度对黑胫病菌菌丝生长抑制的百分率(%),抑制率(%)=[(对照菌落生长直径-处理菌落生长直径)/对照菌落生长直径]×100%。通过DPS软件,将药剂浓度转化成对数(x),抑制率转化成机率值(Y),建立其毒力回归方程Y=Bx+A,根据x与Y的线性关系计算出相关系数(r)、烯酰吗啉抑制菌丝生长50%的有效质量浓度(EC50值),确定供试菌株对烯酰吗啉的敏感性基线。
  1.5 烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性测定
  基于烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性基线,选择适宜的浓度梯度,分别配制相应的烯酰吗啉含药平板,测定其余57个菌株对烯酰吗啉的抗药性水平。
  2 结 果
  2.1 烟草黑胫病菌对烯酰吗啉敏感基线的建立
  从表1可以看出,挑取的11个云南大理烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的EC50范围在0.9556~
  1.8924 μg/mL,最不敏感菌株130401A与最敏感菌株13112对烯酰吗啉的敏感性相差了约2.0倍,平均EC50值为1.4656 μg/mL,表明烯酰吗啉对烟草黑胫病菌的活性较高,云南大理不同地理来源的烟草黑胫病菌菌株对该药剂的敏感性没有明显的差异,烯酰吗啉对大理州烟草黑胫病菌有很好的抑制作用。根据测定的烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性结果,以田间敏感群体的EC50平均值1.4656μg/mL作为大理州烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性基线。
  2.2 大理州烟草黑胫病菌对烯酰吗啉敏感性测定
  根据建立的烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性基线,选择含药0.0、0.5、1.0、2.0、4.0 μg/mL的5个浓度梯度,测定2013年从大理州分离纯化的烟草黑胫病菌菌株对烯酰吗啉的敏感性。从表2可看出,大理州10个县市的红花大金元烟区分离获得的烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的EC50值在0.5857~2.5254 μg/mL,平均EC50为
  1.1118 μg/mL,表明烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的EC50值还相对较低,均为敏感菌株,烯酰吗啉在生产上对烟草黑胫病有很好的防控效果。分离自大理州不同红花大金元产区的烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性没有显著差异,各菌株对烯酰吗啉的抗药性水平不存在地理上的差异,但值得注意的是漾濞县、云龙县和大理市的烟草黑胫病菌EC50值相对其他区域稍高,在今后应采取合理的措施进行黑胫病防控及不同杀菌剂的合理轮换施用,避免长期单一地使用某一类杀菌剂对病原菌群体造成选择压力而导致杀菌剂对烟草黑胫病防治失效。
  3 讨 论
  鉴于烯酰吗啉在防治烟草黑胫病上的应用,目前国内陆续开展了烯酰吗啉对烟草黑胫病菌的敏感性、生物活性及防治效果方面的相关研究。如汪汉成等[10]报道烯酰吗啉对烟草黑胫病菌菌丝生长和孢子囊形成具有很高的抑制作用。胡燕等[11]采用菌丝生长速率法测定了烯酰吗啉对烟草黑胫病菌的毒力,结果表明,20个山东和云南田间菌株的EC50值在0.60~1.28 μg/mL,均属于敏感菌株。苏凯等[12]测定了贵州省47个烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性,发现烯酰吗啉对烟草黑胫病菌菌丝生长和孢子囊形成的抑制基本一致,对菌丝EC50范围为0.7926~4.2327 μg/mL,平均2.4768 μg/mL。朱桂宁等[13]报道烯酰吗啉与甲霜灵没有交互抗性,而且50%烯酰吗啉可湿性粉剂对烟草黑胫病的防效显著优于常用药剂68%精甲霜灵·代森锰锌水分散粒剂。
  本研究建立了云南省大理州烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性基线,并对大理州10个县市的红花大金元烟区分离获得的烟草黑胫病菌的抗药性水平进行了监测,结果显示大理州68个烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的EC50值在0.5857~
  2.5254 μg/mL之间,平均为1.1118 μg/mL,抗药性水平与山东省烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的EC50值在0.60~1.28 μg/mL之间类似[11],但明显低于贵州省烟草黑胫病菌的抗药性水平,表明大理州烟草黑胫病菌对烯酰吗啉较为敏感,烯酰吗啉对烟草黑胫病菌有很好的抑制作用,可成为甲霜灵等苯酰氨类杀菌剂的理想替换药剂用于云南烟草黑胫病的防治。目前在法国已经检测到葡萄霜霉病菌对烯酰吗啉的抗性菌株,证实了烯酰吗啉存在抗性风险[8]。因此应注意在烟草生产中要合理地进行有效药剂的轮换,不要长期单一施用烯酰吗啉类杀菌剂,以免对病原菌造成较大的选择压力,增加抗药性风险。   4 结 论
  大理州烟草黑胫病菌田间菌株对烯酰吗啉的EC50值在0.5857~2.5254 μg/mL,平均为
  1.1118 μg/mL。烯酰吗啉对烟草黑胫病菌的活性较高,各菌株对烯酰吗啉的敏感性在地理上没有明显的差异,大理州烟草黑胫病菌的抗药性风险较低。烯酰吗啉可成为甲霜灵等苯酰氨类杀菌剂的理想替换药剂,用于大理州烟草黑胫病的有效防控,但应与其他无交互抗性的杀菌剂进行合理的轮换使用。
  参考文献
  [1] 王志愿,姜清治,霍沁建. 烟草黑胫病的研究进展[J]. 中国农学通报,2010(21):250-255.
  [2] 徐兴阳,罗华元,欧阳进,等. 红花大金元品种的烟叶质量特性及配套栽培技术探讨[J]. 中国烟草科学2007,28(5):26-30.
  [3] 曹继芬,孙道旺,杨明英,等. 云南省马铃薯和番茄晚疫病菌甲霜灵敏感性及其地理分布[J]. 西南农业学报,2007,20(5):1027-1031.
  [4] 戚仁德,丁建成,高智谋,等. 安徽省辣椒疫霉对甲霜灵的抗药性监测[J]. 植物保护学报,2008,35(3):245-250.
  [5] 王文桥,王丽,韩秀英,等. 北方五省(区)马铃薯晚疫病菌对甲霜灵和精甲霜灵的敏感性检测[J]. 植物保护,2012(3):116-121.
  [6] 袁宗胜,张广民,刘延荣,等. 烟草黑胫病菌对甲霜灵的敏感性测定[J]. 中国烟草科学,2001,22(4):9-12.
  [7] 汪汉成,李文红,冯勇刚,等. 烟草黑胫病化学防治的历史与现状[J]. 中国烟草学报,2011(5):96-102.
  [8] Gisi U, Sierotzki H. Fungicide modes of action and resistance in downy mildews. European Journal of Plant Pathology[J]. 2008, 122: 157-167.
  [9] 朱书生,卢晓红,陈磊,等. 羧酸酰胺类(CAAs)杀菌剂研究进展[J]. 农药学学报,2010(1):1-12.
  [10] 汪汉成,李文红,李兴龙,等. 不同类型杀菌剂对烟草黑胫病菌生物活性的研究[J]. 中国烟草学报,2012(4):46-50.
  [11] 胡燕,王开运,许学明,等. 烯酰吗啉对我国烟草黑胫病菌的毒力研究[J]. 农药学学报,2006(4):339-343.
  [12] 苏凯,桑维钧,张新强,等. 贵州省烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性[J]. 植物保护,2013(1):154-158.
  [13] 朱桂宁,贤小勇,黄福,等. 银法利和烯酰吗啉对烟草黑胫病菌的毒力测定及田间防治试验[J]. 西南农业学报,2011(6):2220-2224.
其他文献
摘 要:为了解河南烟区烤烟焦油释放量的区域特征及其感官质量特征,选取河南烟区初烤烟叶作为试验材料,测定烟叶样品的焦油量并进行感官质量评价,采用常规统计、地统计学等进行数据分析。结果表明:(1)河南烤烟烟叶焦油量的主要分布区间为16.0~22.0 mg/支,分布频率累计值为89.19%;豫西地区焦油量最低,豫南烟区最高,其他地区焦油量居中;不同地区间焦油量存在显著差异,总体空间变化趋势由河南西部向中
期刊
摘 要:本试验采用砂培和营养液培养的方式,探索了打顶后供钾水平对烟草体内钾素积累分配的影响。结果表明,打顶能够促进烟株的生长,增加生物量。钾素在烟株体内移动活跃,无钾培养烟株的根部有大量钾素向叶片运输;提高供钾水平,烟株的钾浓度和钾含量显著提高。打顶后烟株的钾浓度和钾含量下降,但钾素在叶片的积累量增加,上部叶片的钾含量显著提高。  关键词:顶芽;烟草;钾;积累;分配  中图分类号:S572.06
期刊
摘 要:为探究烤烟生产上应用生物有机肥降低化肥用量的可行性及化肥减量的适宜比例,以大理当地烤烟生产所施用的化肥常规用量为对照,研究了用等重生物有机肥代替15%、30%、45%和60%的化肥用量对烤烟生长、经济性状、内在化学成分和感官评吸质量的影响。试验结果表明,应用生物有机肥降低化肥用量30%不仅不会阻碍烤烟生长,还能在一定程度上改善烤烟经济性状,使烟叶化学成分更加协调,从而使各部位烟叶的感官评吸
期刊
摘 要:为确定烟用接装纸中二氧化钛的含量,建立了湿法消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定烟用接装纸中二氧化钛的方法。结果表明,在0.1~200 μg/L(以Ti计,下同)范围内,标准工作曲线的相关系数为1;加标回收率90.95%~101.66%;日内重复性变异系数低于1%,日间重复性变异系数低于5%;仪器检出限为0.02475 μg/L,方法检出限为0.716 μg/L,定量限为2.3
期刊
摘 要:肥料的形态与土壤对养分的吸附固定和养分的有效性密切相关,为探明烤烟施用不同形态肥料的效果,采用盆栽试验研究了烤烟施用不同形态肥料的响应。结果表明,烟叶、烟茎、烟根干物质积累量均以施用颗粒肥处理为最大,分别比施用粉状BB肥的提高2.82%、2.88%和15.03%,比施用水溶液肥的提高2.08%、3.28%和11.93%;烤烟对氮磷钾养分的相对吸收量均以施用颗粒肥处理的最高(均以100%计)
期刊
摘 要:为探讨昆明烟区美引烤烟新品种NC102、NC297的海拔适应性,在栽培措施一致的前提下,分别在安宁县和嵩明县的2个植烟乡镇,以每100 m为海拔梯度,从海拔1700~2200 m共布置10个试验点,研究了种植海拔对两品种烤烟物理性状和化学成分含量的影响。结果表明:①烟叶化学成分和物理性状对种植海拔的敏感性表现为化学成分>物理性状;②在1700~2200 m的研究范围内,烟叶单叶重、开片度、
期刊
摘 要:为了探讨密集烤房与普通烤房烘烤过程中烟叶色素和多酚类物质含量的变化差异,测定了烘烤过程中关键温度点的色素含量、多酚氧化酶活性和多酚类物质含量。结果表明,密集烤房与普通烤房烘烤过程叶绿素总量、叶绿素a和叶绿素b含量变化差异较小。与普通烤房相比,密集烤房烘烤过程中类胡萝卜素含量总体较高;类叶比则表现出先升高后降低的变化趋势,烘烤结束时密集烤房的类叶比较高。密集烘烤过程中多酚氧化酶活性较低,多酚
期刊
摘 要:为探究烟叶钾素与不同土层不同种类土壤钾素关系和解决豫中烟区烟叶钾含量偏低的问题,在2013年河南省许昌市襄城县设置2个钾用量、3次灌水,采用灰色关联分析法对烟叶钾素积累与不同深度土层的不同形态钾素进行了关联分析。结果显示,当灌溉3次且施用低量钾肥时,烟叶钾含量与0~20 cm土层缓效钾关联最显著,关联度是0.7059。当灌溉3次且施用高量钾肥处理下的烟叶钾素与40~60 cm 土层的速效钾
期刊
摘 要:为明确遵义烟叶化学成分对感官评吸质量的影响,根据取样代表性原则,在遵义10县(市)采集上部烟叶样品68份,对样品进行感官质量评价和化学成分检测。简单相关分析结果表明,评吸质量与总糖、还原糖、淀粉、糖碱比、钾氯比、施木克值、糖氮比呈显著正相关,与总植物碱、总氮、氯、挥发碱呈显著负相关。典型相关分析结果反映了总糖、还原糖、糖碱比、糖氮比与香气质、余味、杂气、刺激性得分、评吸总分的正相关性;总植
期刊
摘 要:以文山各县区1991—2010年累计20年的气象观测数据为基础资料,基于模糊数学原理,运用多元统计分析方法对文山烤烟气候适宜性进行了综合评价,并采用线性趋势、三次多项式曲线拟合分析了烤烟生育期的各气候要素的变化特征。结果表明,文山烟区烤烟气候适宜性指数为0.801±0.018,各植烟县市均为最适宜或适宜烤烟气候区;文山20年中大田期日照时数变化总体呈上升趋势,呈现先下降后升高再下降的变化特
期刊