大鼠黏蛋白rMuc3酶切保守基序对其蛋白酶切的影响

来源 :重庆医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：bigrobbin

【摘要】

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目的探讨大鼠黏蛋白rMuc3酶切保守基序LS1KGS2IV1V2中各氨基酸对其蛋白酶切的影响。方法采用定点突变技术，设计相应突变引物，以p20为模板，基于PCR扩增得到突变体，并经测序验证。

【作者】

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李宜成何勇虹彭志红汪荣泉

【机构】

：

第三军医大学西南医院全军消化病研究所

【出处】

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重庆医学

【发表日期】

：

2009年4期

【关键词】

：

黏蛋白rMuc3 酶切基序定点突变转染 SEA组件 rMuc3 cleavage motif mutation transfection SE

【基金项目】

：

基金项目：国家自然科学基金资助项目（30300121,30470401）.

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目的探讨大鼠黏蛋白rMuc3酶切保守基序LS1KGS2IV1V2中各氨基酸对其蛋白酶切的影响。方法采用定点突变技术，设计相应突变引物，以p20为模板，基于PCR扩增得到突变体，并经测序验证。然后通过Western Blot检测各突变体的表达，并分析未酶切部分所占比例。结果细胞裂解物经Western Blot免疫印迹实验，证实在55kd处存在未酶切的部分，在30kd处存在可被抗V5抗体检测的N端部分，经过Quantityone分析后发现，s2／A完全抑制了酶切的发生，G／A抑制了绝大部分的酶切（未酶切部分占

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