目的建立薄层色谱（TLC）与表面增强拉曼光谱（SERS）联用技术对改善睡眠类保健食品的主要成分（褪黑素、维生素B₆）的快速检测新方法。方法以环己烷-乙酸乙酯-乙醇（5∶3.5∶2,V/V）为展开剂,利用TLC将改善睡眠类保健食品中主要成分与保健食品基质初步分离,在UV_254nm下检测定位;以780 nm激光为激发波长,水相银胶溶液为表面增强剂,采用SERS法对TLC上的微量成分进行原位定性检测。通过模拟阳性样品试验,考察保健食品基质对褪黑素、维生素B₆的TLC-SERS的影响,并考察褪黑素及维生素B₆的检出限,并随机对市售4种改善睡眠类保健食品进行检测。结果褪黑素、维生素B₆的TLC-SERS与相应对照品的拉曼光谱特征峰存在明显相关性;保健食品的基质对褪黑素和维生素B₆的检测不存在干扰;褪黑素和维生素B₆的检出限为10、5μg。市售改善睡眠类保健食品主要成分的TLC-SERS与褪黑素或维生素B₆基本相同。结论本法准确、灵敏、快速、简单,为检测混合样品等复杂体系主要成分的定性鉴别检测提供一种有效方法。