【摘 要】
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目的探讨抑癌基因PTEN的表达在大肠癌转移侵袭过程中的作用.方法 (1)应用Nothern blot和免疫组织化学的方法检测47例大肠癌组织中PTEN mRNA和蛋白的表达,分析其与大肠癌转移的关系.(2)利用Western blot法检测不同转移潜能的大肠癌细胞系内PTEN蛋白的表达水平,说明PTEN蛋白的表达对大肠癌细胞转移潜能的影响.(3)用阳离子脂质体作载体,将PTEN基因转染大肠癌细胞株
【机 构】
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解放军150医院肛肠外科,471031,200003,上海,第二军医大学长征医院普外科,第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作信号转导实验室
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目的探讨抑癌基因PTEN的表达在大肠癌转移侵袭过程中的作用.方法 (1)应用Nothern blot和免疫组织化学的方法检测47例大肠癌组织中PTEN mRNA和蛋白的表达,分析其与大肠癌转移的关系.(2)利用Western blot法检测不同转移潜能的大肠癌细胞系内PTEN蛋白的表达水平,说明PTEN蛋白的表达对大肠癌细胞转移潜能的影响.(3)用阳离子脂质体作载体,将PTEN基因转染大肠癌细胞株LOVO后,采用计数细胞悬液加到粘附底物后20和120min的细胞贴壁数用以测定细胞粘附能力,采用Costar的浸润小室检测PTEN基因转染前后细胞的浸润能力.结果 (1)在有淋巴结及远处转移的大肠癌组织中,PTEN mRNA和蛋白的表达显著低于无转移者;(2)转移潜能高的LOVO细胞PTEN的表达量通过显著低于转移潜能较低的HT-29、LS-174T;(3)LOVO、转染pcDNA3.0-PTEN的细胞(LOVO/pcDNA3.0-PTEN)在特异性粘附底物(Laminin)上20min时贴壁率分别为(18.6±1.4)%和(13.9±0.5)%(P<0.05),120min时贴壁率分别为(71.2±2.5)%和(56.0±1.6)%(P<0.05);(4)采用Costar的浸润小室对LOVO、LOVO/pcDNA3.0-PTEN细胞的浸润能力分析结果显示:细胞悬液静置培养6h后,对照细胞LOVO浸润穿透多聚碳膜的细胞数为(11.7±1.7)个,LOVO/pcDNA3.0-PTEN细胞穿透多聚碳膜的细胞数为(7.5±1.6)个(P<0.05).结论在肿瘤组织内抑癌基因PTEN的表达与大肠癌的转移侵袭行为密切相关.
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