【摘 要】
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目的:构建乌苏里蝮蛇(Gloydius ussuriensis)毒腺cDNA文库,克隆、分析丝氨酸蛋白酶基因,为进一步基因研究和操作奠定基础.方法:采用链转化法和长距离PCR技术,构建乌苏里蝮蛇
【机 构】
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吉林大学再生医学科学研究所生化与生物技术药物教研室
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目的:构建乌苏里蝮蛇(Gloydius ussuriensis)毒腺cDNA文库,克隆、分析丝氨酸蛋白酶基因,为进一步基因研究和操作奠定基础.方法:采用链转化法和长距离PCR技术,构建乌苏里蝮蛇毒腺cDNA文库.用TRIzol试剂盒从乌苏里蝮蛇毒腺提取总RNA,再用Oligo(dT)-生物素-链菌素-磁珠法从总RNA中分离mRNA,反转录合成cDNA第一链,长距离PCR合成第二链cDNA.回收cDNA,用限制性内切酶消化产生粘性末端,层析去除小于500 bp片段,纯化的cDNA插入载体pBluescrip
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