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目的
探讨优化脂肪间充质干细胞(ADSC)定向分化为角质形成细胞(KC)的诱导方法。
方法采用胶原酶消化法分离培养ADSC，用流式细胞仪检测间充质干细胞表面标志物CD34、CD44、CD90表达。并对比不同诱导培养基对ADSC向KC定向分化的影响。组1含49% KC培养的2%胎牛血清(FBS)的dulbecco改良依格尔培养基(DMEM)；组2无血清KC培养基(KSFM)；组3含5 μmol/L全反式维甲酸(ATRA)的10% FBS DMEM培养基；10% FBS DMEM作为对照组，各组培养14 d后用免疫组织化学法检测角蛋白CK14与F-肌动蛋白表达。
结果分离培养的细胞形态呈纺锤形；高表达CD44、CD90，不表达CD34。细胞经诱导后可向成骨细胞和成软骨细胞分化，表明分离细胞为ADSC。不同诱导培养基诱导后，组1细胞形态未出现明显变化；组2约10%细胞形态发生改变；组3细胞形态改变较为明显，约20%细胞呈不规则多边形。组3细胞免疫荧光染色发现细胞呈现出铺路石样貌，显示出有组织细胞骨架网络，边缘有密集肌动蛋白纤维；部分细胞呈CK14阳性表达。
结论ADSC经ATRA诱导后有较高诱导分化率，可定向分化为KC。