【摘 要】
：
目的构建抗前列腺特异抗原(PSA)单链抗体(scFv)/ 人羧肽酶A(Hcpa) 融合基因,为前列腺癌的抗体导向酶-前体药物疗法奠定基础. 方法在已克隆抗 PSA scFv和Hcpa 基因的基础上,用
【机 构】
：
第四军医大学唐都医院中心实验室,陕西,西安,710038第四军医大学,基础部生物化学教研室;第四军医大学,西京医院泌尿外科;
论文部分内容阅读
目的构建抗前列腺特异抗原(PSA)单链抗体(scFv)/ 人羧肽酶A(Hcpa) 融合基因,为前列腺癌的抗体导向酶-前体药物疗法奠定基础. 方法在已克隆抗 PSA scFv和Hcpa 基因的基础上,用加端PCR分别在scFv基因的3′端和Hcpa基因的5′端加上部分连接肽(lin ker)基因序列,回收后混合;应用重叠延伸拼接法,将抗PSA scFv基因和Hcpa基因通过linker序列串联为scFv/Hcpa融合基因;并将构建的融合基因克隆到融合表达载体Pgex -4T-1中进行表达. 结果序列测定结果表明,构建的抗PSA scFv/Hcpa 融合基因中 scFv和Hcpa序列均正确,scFv和Hcpa间有18 bp 的linker序列,推导的氨基酸序列为GSGGSG ,与设计的序列相符. 融合基因经IPTG诱导表达重组蛋白并以SDS-PAGE分析,在Mr为9 4 000 左右出现一条新生蛋白带,表达量约占菌体总蛋白的34%. 结论成功构建并原核表达了抗PSA scFv/Hcpa融合基因.
其他文献
0 引言我科自1989/1998-12共收治脑脓肿患者89例, 约占全科同期住院患者的1.6%, 现就诊治过程中的几个问题进行初步探讨.
0 引言菟丝子为重要的温补肾阳药物之一,多用于治疗内分泌功能紊乱性疾病如更年期综合征、不孕症、月经不调等[1],但其作用机制不清.我们观察了菟丝子复方对生殖功能减退大鼠
0 引言晚期妊娠引产方法诸多,为探讨各种方法的有效与安全性,我们通过对米索前列醇(米索)、蓖麻油和传统的催产素引产进行临床观察报道了384例观察结果,总结其临床效果及引产
0 引言端粒是构成真核生物染色体的天然末端. 端粒酶是催化增加染色体末端端粒重复序列反应的核糖核酸蛋白复合物,由RNA和蛋白质两部分组成,其RNA有与端粒互补的模板及3端
目的 研究 p1 6基因对胆管癌细胞的作用 .方法 将重组体腺病毒 p1 6转移到人胆管癌细胞 QBC939,对 p1 6基因的表达、细胞的生长抑制及机制进行分析 .结果 用 Ad-Lac Z进行
1 病例报告 患者 ,女 ,6 0岁 ,因反复发热 2 5 a、全身性关节疼痛 2 3 a,双下肢水肿 2 mo,腹胀、尿少 1mo,于 1998- 10 - 2 0入院 .1975年患者出现发热 ,全身关节疼痛 ,四
1 病例报告患者,女,25岁. 末次月经1999-01-20,患者于1999-03-10主因停经49 d,阴道流血7 d,腹痛5 h就诊,诊断为"宫外孕". 急诊行剖腹探查术,术中见右侧输卵管壶腹部妊娠(流产
目的 研究汉坦病毒 (HTV)感染后对细胞应激基因表达的影响 .方法 用 HTV感染其敏感细胞株 Vero E6细胞 ,用 Western印迹杂交、RNA斑点杂交及原位杂交分别分析热休克蛋白 (H
目的 观察小鼠对 IL- 12基因表达质粒与 HBV S基因疫苗联合免疫的免疫应答 .方法 用已构建的 HBV S基因疫苗 (p CR3.1- S)和表达 IL- 12 p35和 p40蛋白的真核表达载体 p WR
0 引言 我院从 1983- 0 1/ 1997- 12收治肾损伤患者 16 7例 .报告如下 :1 临床资料1.1 一般资料 本组 16 7例 ,男 131例 ,女 36例 .年龄 5～6 3岁 .闭合性损伤 146例 ,开