【摘 要】
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目的建立乙型肝炎病毒(HBV)复制状态模型.方法体外连接HBVDNA获得6.4kb的双拷贝DNA片段,然后将其插入pcDNA3载体的Eco RV位点,通过聚合酶链反应(PCR)和酶切筛选获得头尾串联
【机 构】
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广州医学院第一附属医院肝病研究室,第一军医大学南方医院感染内科,第一军医大学热带病研究所
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目的建立乙型肝炎病毒(HBV)复制状态模型.方法体外连接HBVDNA获得6.4kb的双拷贝DNA片段,然后将其插入pcDNA3载体的Eco RV位点,通过聚合酶链反应(PCR)和酶切筛选获得头尾串联双拷贝HBV全基因重组真核表达质粒,再通过脂质体介导法转染肝癌细胞.结果通过G418筛选,对阳性克隆细胞进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western免疫印迹分析,证明已将HBV全基因重组真核表达质粒转染至肝癌细胞并获得稳定表达.结论通过脂质体介导法将HBV全基因转染至肝癌细胞,成功
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