【摘 要】
：
[目的]克隆人巨细胞病毒(HCMV)UL123基因cDNA全长(ie1)及其外显子4(ie1-exon 4),构建原核表达重组质粒,诱导立即早期蛋白1(IE1)及其C-端86-491氨基酸(IE1-C86～491)表达,并鉴定
【机 构】
：
中南大学湘雅医学院微生物学教研室,湖南,长沙,410078
论文部分内容阅读
[目的]克隆人巨细胞病毒(HCMV)UL123基因cDNA全长(ie1)及其外显子4(ie1-exon 4),构建原核表达重组质粒,诱导立即早期蛋白1(IE1)及其C-端86-491氨基酸(IE1-C86～491)表达,并鉴定表达产物.[方法]分别用RT-PCR和PCR法将ie1和ie1-exon 4从感染了HCMV的人胚肺成纤维细胞(HEL)中扩增出来,再分别克隆入原核表达载体pTWIN1上intein2的N端,转化大肠杆菌,经PCR、限制性酶切和测序鉴定阳性重组子,在低温和低IPTG浓度下诱导重组子表达可溶性重组融合蛋白rIE1/intein2和rIE1-C86～491/intein2,用SDS-PAGE和Western Blotting对表达产物进行鉴定.[结果]经PCR、限制性酶切和测序鉴定重组质粒pTWIN1/ie1和pTWIN1/ie1-exon 4构建成功,SDS-PAGE和Western Blotting分析表明融合蛋白在大肠杆菌中表达.[结论]成功克隆并表达了ie1和ie1-exon 4.
其他文献
目的 探讨乌司他丁对体外循环(CPB)所致急性肺损伤的保护作用.方法 30例择期首次心脏瓣膜置换术患者随机分为乌司他丁组和对照组,各15例.于麻醉诱导前、CPB前、CPB结束后30 min及24 h各时点分别测定肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素8(IL-8)和白介素10(IL-10)血浆水平,于CPB前、CPB结束后10 min、30 min各时点分别测定呼吸指数(RI).
目的探讨髋臼后壁粉碎骨折进行髂骨移植再造的可行性及远期疗效观察.方法 1994年6月～2000年6月间应用髂骨移植再造后壁治疗髋臼后壁粉碎性骨折合并骨缺损13例,随访总结疗效及
沙钢5800m~3高炉供料系统的工艺特点主要是:矿、焦槽集中布置,采用混凝土结构和钢结构混合设计;采用焦丁回收和小烧结矿回收工艺;利用返矿皮带运输原料除尘灰;槽下烧结返矿皮
压路机用摆动式切边压边装置,由机架、摇臂、刀具、和液压缸等结构组成,配备有液压系统、电气系统和洒水系统等部分,是一种结构简单紧凑、成本低廉、工作效率高的工作装置,既
以4,4’-六氟亚异丙基-邻苯二甲酸酐(6FDA)和4,4’-二胺基二苯醚(4,4’-ODA)为原料制备了含氟聚酰亚胺薄膜,然后通过水解、激光打印、离子交换、化学还原等技术得到银和铜双
冠心病已经成为危害全人类健康的常见病及多发病,并且发病年龄越来越年轻。青年冠心病与老年冠心病不同,有自己的特点。国外关于它的研究相对较多,而国内相关报道较少。现就
随着自由基医学研究的日趋深入,大量的研究证明动脉粥样硬化、心肌缺血再灌注损伤、心律失常、充血性心力衰竭、高血压等心血管疾病的发生、发展与氧化应激密切相关。本文通
目的 探讨阴道超声检测早孕期妇女卵黄囊的变化规律及意义.方法经阴道超声测量3 840例要求人工流产早孕妇女的卵黄囊、头臀距及平均妊娠囊直径,利用细胞遗传学试验检测每例绒毛的染色体,根据超声下卵黄囊的声像学特点,分为研究组(超声异常组)与对照组(超声正常组),比较两组染色体异常的发生率.结果研究组染色体异常的发生率显著高于对照组(χ2 =159.89,P《0.001).结论卵黄囊超声声像学异常对早孕
抗癫癎药物治疗是癫癎治疗的主要手段,经过正规抗癫癎治疗,临床发作消失,病人及家属就会要求停药。但如何选择科学指标指导病人停药,减少或避免癫癎复发是临床急需解决的问题
目的 评价伊曲康唑注射液治疗儿童肺部真菌感染的有效性和安全性.方法 以2004年5月～2005年10月武汉市儿童医院ICU病房13例确诊为肺部真菌感染患儿为研究对象,所有患儿在停用抗生素或改用窄谱抗生素、停用肾上腺皮质激素、加强对症和支持治疗基础上,给予伊曲康唑注射液治疗.治疗期间观察患儿临床症状体征变化,反复监测血、尿常规和肝、肾功能;反复取痰液标本作真菌学检查(涂片+培养);定期复查胸片;并记