探讨MUC1蛋白在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤中的表达及其诱导的抗肿瘤免疫反应。
方法收集滨州医学院附属医院及山东大学齐鲁医院神经外科自2009年3月至2014年12月手术切除的人垂体腺瘤标本86例,其中侵袭性垂体腺瘤42例,非侵袭性垂体腺瘤44例,采用免疫组化染色、Western blotting检测标本MUC1蛋白的表达;术前取患者外周全血400 mL,分离外周血单个核细胞(PBMC)并诱导培养树突状细胞(DCs),将DCs分为MUC1组、5 μg/mL poly I:C组、25 μg/mL poly I:C组、50 μg/mL poly I:C组、脂多糖(LPS)组、对照组,分别加入100 μL 50 μg/mL MUC1、5 μg/mL poly I:C、25 μg/mL poly I:C、50 μg/mL poly I:C、50 μg/mL LPS和100 μL溶剂,培养48 h后ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-1β、IL-6的浓度;将DCs分为PBS对照组、poly I:C组、MUC1+poly I:C组,分别加入100 μL PBS、50 μg/mL poly I:C、50 μg/mL MUC1+50 μg/mL poly I:C,培养48 h后流式细胞仪(FCM)检测细胞CD40、CD80、CD83、CD14、组织相容性基因位点抗原DR(HLA-DR)的表达;C57BL/6小鼠24只按随机数字表法分为MUC1组、MUC1+poly I:C、PBS对照组,每组8只,分别在第1、15天皮下注射1 mL 50 μg/mL MUC1抗原、50 μg/mL MUC1抗原+50 μg/mL poly I:C和PBS。注射后7 d取各组小鼠脾细胞(CTL)加入到体外培养的小鼠垂体瘤细胞AtT20中,D-乳酸脱氢酶(D-LDH)释放试剂盒检测各组CTL的杀伤活性。
结果侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤中MUC1表达阳性率分别为90.4%(38/42)、20.5%(9/44) ,MUC1蛋白在侵袭性垂体腺瘤中表达(2.0353±0.0359)高于非侵袭性垂体腺瘤(0.3488±0.0205),差异有统计学意义(P<0.05);ELISA检测显示MUC1组、5 μg/mL poly I:C组、25 μg/mL poly I:C组、50 μg/mL poly I:C组DCs上清液中3种细胞因子的浓度均依次增加,差异有统计学意义(P<0.05) ;FCM检测显示PBS对照组、poly I:C组、MUC1+poly I:C组细胞CD14的表达依次减少,CD40、CD80、CD83、HLA-DR的表达依次增加,差异有统计学意义(P<0.05)。D-LDH释放试剂盒检测结果显示PBS对照组、MUC1组、MUC1+poly I:C小鼠CTL细胞活性依次增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论MUC1蛋白在侵袭性垂体腺瘤中表达较高,MUC1+poly I:C可以有效的诱导抗肿瘤免疫反应,抑制侵袭性垂体腺瘤的进展。