【摘 要】
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目的 观察Toll样受体3(TLR3)对人肺腺癌细胞A549的增殖、抗凋亡及免疫逃逸方面的影响.方法 给予TLR3-RNA干扰(RNAi)慢病毒转染组、未转染组和空载对照组TLR3的配体Poly(I∶C)刺激后,分别通过流式细胞术检测B7-H1的表达,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测前列腺素E2(PGE-2)的表达,Western blot检测磷酸化p38的含量,并采用膜联蛋
【机 构】
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430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院心血管内科,430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院心胸外科,430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院心胸外科,430030
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目的 观察Toll样受体3(TLR3)对人肺腺癌细胞A549的增殖、抗凋亡及免疫逃逸方面的影响.方法 给予TLR3-RNA干扰(RNAi)慢病毒转染组、未转染组和空载对照组TLR3的配体Poly(I∶C)刺激后,分别通过流式细胞术检测B7-H1的表达,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测前列腺素E2(PGE-2)的表达,Western blot检测磷酸化p38的含量,并采用膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)双染色法检测A549细胞的凋亡.结果 在Poly(I∶C)刺激时间及浓度相同的情况下,转染TLR3-RNAi慢病毒载体的A549细胞组中B7-H1阳性细胞百分比、PGE-2的表达以及磷酸化p38的百分比相对值均低于未转染组和空载对照组(P＜0.01).凋亡实验显示,转染TLR3-RNAi慢病毒载体的A549细胞组细胞凋亡率[(44.40 ±1.41)％]明显高于未转染慢病毒载体组(34.70±0.89)％]和空载对照组[(36.50±1.12)％,P＜0.01.结论 TLR3基因沉默抑制了A549细胞中p38、PGE-2、B7-H1的表达,并降低了细胞的抗凋亡能力。
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