【摘 要】
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目的 探讨Smad7敲低后对原代心肌成纤维细胞增殖、迁移、胶原分泌和细胞表型转化的影响。方法 原代培养10只SD大鼠乳鼠的心肌成纤维细胞，免疫组织化学染色鉴定细胞。采用慢病毒转染方法敲低心肌成纤维细胞Smad7的表达，Western blotting验证Smad7蛋白敲低效率，实时无标记细胞仪检测心肌成纤维细胞的增殖情况，细胞划痕实验检测细胞的迁移情况，Western blotting检测Ⅰ型胶原
【机 构】
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贵州医科大学贵州省高等学校天然药物药理与成药性评价特色重点实验室
【基金项目】
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贵阳市科技计划项目（筑科合同[2017]30-17）； 贵州省科技合作计划项目（黔科合LH字[2016]7356）； 中央引导地方科技科技发展专项基金（黔科中引地[2016]4007）；
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目的 探讨Smad7敲低后对原代心肌成纤维细胞增殖、迁移、胶原分泌和细胞表型转化的影响。方法 原代培养10只SD大鼠乳鼠的心肌成纤维细胞，免疫组织化学染色鉴定细胞。采用慢病毒转染方法敲低心肌成纤维细胞Smad7的表达，Western blotting验证Smad7蛋白敲低效率，实时无标记细胞仪检测心肌成纤维细胞的增殖情况，细胞划痕实验检测细胞的迁移情况，Western blotting检测Ⅰ型胶原蛋白（ColⅠ）和细胞表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达情况。结果 成功培养心肌成纤维细胞，并进行细胞鉴定。慢病毒转染的心肌成纤维细胞感染复数（MOI）值为100,转染后88.33%的细胞表达绿色荧光蛋白，慢病毒敲低组Smad7的蛋白表达明显下调（P＜0.05）。慢病毒敲低Smad7后细胞增殖明显下降（P＜0.01）,细胞迁移率明显减少（P＜0.01）。与对照组相比，慢病毒敲低组细胞ColⅠ表达明显下降（P＜0.01）,α-SMA表达明显升高（P＜0.01）。结论 Smad7表达敲低后，心肌成纤维细胞的细胞功能发生明显改变，这些改变可能与Smad7下调导致心肌纤维化程度加重有关。
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