【摘 要】
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目的该研究通过SGK2α基因的克隆、原核蛋白表达以及纯化,制备抗SGK2α抗体,为进一步研究SGK2α蛋白的生物学功能奠定基础。方法利用原核表达载体PGEX-4T-3构建重组质粒,并在
【机 构】
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齐齐哈尔医学院生物化学教研室,中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院肿瘤研究所病因室分子肿瘤学国家重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（No：30570904）, 黑龙江省教育厅资助项目（No：11531431）
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目的该研究通过SGK2α基因的克隆、原核蛋白表达以及纯化,制备抗SGK2α抗体,为进一步研究SGK2α蛋白的生物学功能奠定基础。方法利用原核表达载体PGEX-4T-3构建重组质粒,并在大肠杆菌中通过IPTG诱导表达;亲和层析法纯化重组蛋白;以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大耳白兔制备抗SGK2α多克隆抗体,ELISA方法检测抗体效价,免疫印迹法检测抗体的特异性。结果构建了PGEX-4T-3-SGK2α原核表达质粒,经原核表达和亲和层析获得GST-SGK2α融合蛋白,蛋白纯度在90%以上;利用GST-SGK
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