THP-1源巨噬细胞上清液对类风湿性关节炎 成纤维细胞和血管内皮细胞的作用

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在类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)病理过程中,成纤维细胞的“肿瘤”样转型被认为与M1型巨噬细胞分泌的诱导因子有关,表现为增殖过度、凋亡减少以及异常分泌促炎症因子.此外,成纤维细胞的异常转型也会通过反馈调节进一步刺激巨噬细胞向M1型极化.目前关于M1型巨噬细胞对成纤维细胞和血管内皮细胞的体外作用尚未有报道.为探讨RA滑膜中不同细胞间的相互作用,该研究利用实时荧光定量法检测人髓系白血病单核细胞(THP-1)源M0、M1型巨噬细胞中白细胞介素-8(IL-8)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因的mRNA表达量,酶联免疫吸附法测定THP-1源M1型巨噬细胞上清液炎症因子的含量,通过细胞增殖实验测定不同比例M1型巨噬细胞上清液对成纤维细胞和血管内皮细胞的增殖影响.结果显示,THP-1源M1型巨噬细胞主要分泌白细胞介素-1β、白细胞介素-8蛋白.对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(MH7A)而言,M1型巨噬细胞上清液与含血清RPMI(Roswell Park Memorial Institute)培养基混合(比例为7:3)作用48 h能促进细胞增殖;对人脐静脉细胞融合细胞(EA.hy926)而言,M1型巨噬细胞上清液与含血清DMEM(Dulbecco Modified Eagle Medium)培养基混合(比例为6:4或7:3)处理72 h显著促进了细胞的增殖.该研究可为建立RA血管翳类组织模型提供前期研究的数据支撑,有助于体外构建抗RA药物高通量筛选平台.
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