【摘 要】
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构建了含分枝杆菌抗原ESAT-6(6 kDa)分泌蛋白(结构基因)的真核表达载体pJW4303,进行了酶切鉴定和序列分析,确定含有正确的读码框.用脂质体介导法将重组表达质粒导入COS7细胞
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)
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构建了含分枝杆菌抗原ESAT-6(6 kDa)分泌蛋白(结构基因)的真核表达载体pJW4303,进行了酶切鉴定和序列分析,确定含有正确的读码框.用脂质体介导法将重组表达质粒导入COS7细胞内并瞬时表达,收集表达细胞或浓缩上清液,进行SDS-PAGE电泳,用结核杆菌特异性抗体进行免疫印迹检测,证明上述重组质粒能在哺乳动物细胞中表达出特异蛋白.重组表达质粒肌注免疫小鼠,首免后21 d,未检测到特异性抗体,二免和三免21 d后ESAT-6的特异性抗体平均效价分别为1:400和1:800.三免后21 d ESAT
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