论文部分内容阅读
目的 探讨转甲状腺素蛋白(transthyretin,TTR)在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)患者中的表达及对高糖(high glucose,HG)诱导的人视网膜色素上皮细胞(human retinal pigment epithelium cells 19,ARPE-19)增殖、迁移和血管形成的影响和机制.方法 收集DR患者(n=43)和健康体检者(n=45)血清,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清TTR和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平,逆转录-定量聚合酶链反应(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)检测血清中长链非编码RNA母系表达基因3(maternally expressed gene 3,MEG3)水平.将细胞分为对照组、HG组、HG+TTR组、HG+pcDNA 3.1组、HG+pcDNA3.1-MEG3组、HG+TTR+pcDNA3.1-MEG3组,qRT-PCR和Western blot检测各组细胞中TTR、MEG3和VEGF表达水平,细胞计数试剂(cell counting kit-8,CCK8)检测细胞增殖,transwell试验检测细胞迁移,BD Matrigel基质培养测定血管形成.结果 与健康体检者比较,DR患者血清TTR和VEGF水平显著升高,MEG3水平显著降低(t值分别为7.81,13.04,11.89,P均<0.001).与对照组比较,HG组TTR和VEGF蛋白表达升高,MEG3的mRNA水平降低(t值分别为6.45,5.68,8.13,P均<0.05).与HG组比较,HG+TTR组VEGF蛋白表达升高,MEG3的mRNA水平降低(t值分别为7.43,9.29,P均<0.01),细胞的增殖、迁移和血管形成减少(t值分别为5.32,3.22,4.32,P0.05),MEG3表达上调(t=12.02,P<0.01),VEGF表达下调(t=7.05,P<0.01),促进了细胞增殖、迁移和血管形成(t值分别为6.45,5.22,11.32,P均<0.01).结论 TTR在DR患者血清和HG诱导的ARPE-19细胞中高表达,可能通过调控lncRNA MEG3表达上调VEGF表达,抑制ARPE-19细胞增殖、迁移和血管形成.