【摘 要】
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目的:应用定量蛋白质组学探究半夏泻心汤抗慢性胃炎的生物学基础.方法:实验大鼠分为正常组、慢性胃炎模型组、半夏泻心汤组,采用56％乙醇灌胃法,4周建立慢性胃炎模型,给药治疗
【机 构】
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上海中医药大学,上海201203;上海健康医学院,上海201318;上海中医药大学,上海201203
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目的:应用定量蛋白质组学探究半夏泻心汤抗慢性胃炎的生物学基础.方法:实验大鼠分为正常组、慢性胃炎模型组、半夏泻心汤组,采用56％乙醇灌胃法,4周建立慢性胃炎模型,给药治疗后,取胃组织进行苏木素-伊红(HE)染色,观察各组大鼠胃组织病理损伤及改善情况,提取胃组织蛋白质,运用串联质谱标签(TMT)定量蛋白质组学研究各组之间的差异蛋白情况,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)验证关键的差异表达蛋白.结果:从大鼠胃组织中鉴定出4 452个蛋白,其中模型组与正常组差异蛋白为318个.经半夏泻心汤干预后,与模型组相比,共有258个差异蛋白,这些差异蛋白主要富集于cell killing,nucleoid及hijacked molecular function等.京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集发现,作用涉及到三羧酸循环,steroid hormone biosynthesis,retrograde endocannabinoid等信号通路,同时还涉及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)和核转录因子(NF)-κB信号通路.Western blot验证发现14-3-3 theta,干细胞因子(SCF),肌腱蛋白C(TN-C),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),线粒体丙酮酸载体(Mpc1)和免疫相关蛋白GTP酶4(GIMAP4)可能是该方治疗慢性胃炎的关键蛋白.结论:半夏泻心汤治疗慢性胃炎的作用机制涉及到能量代谢、激素调节、炎症反应及免疫过程,利用差异蛋白质组学寻找的靶点蛋白及其涉及的信号通路可能是半夏泻心汤治疗慢性胃炎的生物学基础.
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