【摘 要】
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目的 制备穿膜肽-β-葡萄糖苷酶偶联物并鉴定其穿膜活性和酶活性.方法 采用异型双功能交联剂N-琥珀酰亚胺基-3-（2-吡啶二硫）-丙酸酯（SPDP）将穿膜肽·增强型绿色荧光蛋白融合
【机 构】
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广西医科大学第一附属医院,广西医科大学基础医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81160314)
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目的 制备穿膜肽-β-葡萄糖苷酶偶联物并鉴定其穿膜活性和酶活性.方法 采用异型双功能交联剂N-琥珀酰亚胺基-3-（2-吡啶二硫）-丙酸酯（SPDP）将穿膜肽·增强型绿色荧光蛋白融合蛋白（CPPs-EGFP）、β-葡萄糖苷酶进行共价交联,经Ni-NAT Superflow Cartridge、Sephadex G-75层析柱分离纯化.采用还原型和非还原型聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）对偶联物进行鉴定；偶联物与膀胱癌EJ细胞共同孵育,置于荧光显微镜下观察,鉴定其穿膜活性；采用β-葡萄糖苷酶测
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