【摘 要】
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目的 探讨胶原酶消化组织块结合法分离纯化新生兔肺成纤维细胞。方法 取新生兔肺,剪成组织块,用Ⅳ型胶原酶轻度消化后,进行组织块贴壁培养,分离纯化肺成纤维细胞,然后进行原
【机 构】
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浙江省医学科学院生物工程研究所,浙江省医学科学院保健食品研究所
【基金项目】
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基金项目：浙江省医药卫生科技计划项目（2015ZDA011、2015KYB092、2016KYB071）,浙江省科技计划公益技术研究项目（2015C33109）.
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目的 探讨胶原酶消化组织块结合法分离纯化新生兔肺成纤维细胞。方法 取新生兔肺,剪成组织块,用Ⅳ型胶原酶轻度消化后,进行组织块贴壁培养,分离纯化肺成纤维细胞,然后进行原代、传代培养,用MTT法测定细胞生长曲线。结果 组织块贴壁培养2 d,镜下可见组织块周边有少量长梭形细胞逸出,4 d时组织块周围有大量细胞爬出,生长迅速,7 d时接近融合,9 d时高度融合。传代2次后杂细胞基本去除,细胞活性状态较好的为1~4代。5~6代后细胞的增殖能力逐渐下降,细胞出现逐渐老化现象。结论 Ⅳ型胶原酶轻度消化后结合组织块贴壁法
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