印第安纳型水泡性口炎病毒核衣壳蛋白基因在毕赤酵母表达系统中的表达

来源 :中国动物检疫 | 被引量 : 0次 | 上传用户：s362613932

【摘要】

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将含有IN型VSV核衣壳蛋白基因的重组质粒pET-32a／N用EcoRI和NotI进行双酶切．目的基因克隆到表达载体pPICZαA，构建重组质粒pPICZαA／N。用SacI酶切线性化．并以电转化方法转化受体

【作者】

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陈义平盛祖勋赵永刚王宝安王志亮

【机构】

：

中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心,江苏省吴江市兽医站,扬州大学兽医学院

【出处】

：

中国动物检疫

【发表日期】

：

2006年9期

【关键词】

：

水泡性口炎病毒核衣壳蛋白基因毕赤酵母表达系统 Vesicular stomatitis virus Pichia pastoris expression s

【基金项目】

：

国家科技攻关计划项目（2004BA519A53）

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将含有IN型VSV核衣壳蛋白基因的重组质粒pET-32a／N用EcoRI和NotI进行双酶切．目的基因克隆到表达载体pPICZαA，构建重组质粒pPICZαA／N。用SacI酶切线性化．并以电转化方法转化受体酵母菌GS115，PCR证实目的基因整合到重组酵母菌染色体中，经鉴定所获得的重组酵母菌株为Muts表型。用甲醇对重组酵母进行诱导表达，经SDS-PAGE和Western blot鉴定，核衣壳蛋白基因在毕赤酵母中获得表达．目的蛋白分子量大小为约75kDa，表达量约占菌体总量的20％，并能够被VSV阳性血

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