弓形虫β-酮脂酰ACP合成酶的表达及鉴定

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目的构建刚地弓形虫β-酮脂酰ACP合成酶(FABZ)原核表达质粒并在大肠杆菌中表达,建立检测和定位虫体FABZ蛋白表达的方法。方法运用RT-PCR技术扩增弓形虫RH株速殖子fabz基因,克隆至pET32a(+)载体,在大肠杆菌Rosetta中诱导表达。Ni-NTA亲合层析柱纯化重组FABZ蛋白并制备其兔多克隆抗体。采用免疫印迹(Western blotting)技术和间接免疫荧光技术(IFA)检测和定位FABZ在虫体内表达。结果成功表达重组FABZ蛋白,并制备其多克隆抗体。Western blotting
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