过氧化氢诱导HepG2细胞氧化应激模型的建立

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建立过氧化氢(H2O2)介导的HepG2细胞氧化应激模型,为筛选抗氧化活性物质以及揭示抗氧化应激机制提供细胞学模型。采用不同浓度H2O2处理Hep G2细胞不同时间,噻唑蓝(3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT)法检测细胞存活率,二氯荧光黄双乙酸盐(2′,7′-Dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)法检测活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平,分光光度法检测丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量,以及超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catlase,CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)活性。结果表明,随着H2O2浓度升高和作用时间延长,Hep G2细胞存活率降低,ROS水平和MDA含量升高,SOD、CAT和GSH-Px活性降低。与对照组相比,200μmol/L H2O22处理Hep G2细胞6 h,细胞存活率显著降低(P<0.05),仅为63.1%;ROS水平和MDA含量显著升高(P<0.05),分别为127.1%和135.1%;SOD、CAT和GSH-Px活性显著降低(P<0.05),分别为77.28%、78.56%和77.41%。H2O2诱导HepG2细胞建立氧化应激模型的最佳条件为H2O2作用浓度200μmol/L,作用时间6 h。
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